植物细胞骨架的观察_观察植物细胞
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实验六 植物细胞骨架的光学显微镜观察
一、实验目的：掌握植物细胞骨架处理及染色方法。
二、实验原理：用适当浓度的TritonX-100处理时，可将细胞内蛋白质破坏，但细胞骨架系统的蛋白质却被保存，后者用考马斯亮兰R250染色，可在光学显微镜下观察到细胞骨架的网状结构。
三、实验试剂：
1、M-缓冲液；
2、pH6.8磷酸缓冲液；
3、1% TritonX-100，用M-缓冲液配制；
4、0.2%考马斯亮兰R250；
5、3%戊二醛，用pH6.8磷酸缓冲液；
四、实验步骤：
1、撕取洋葱鳞茎内表皮细胞（约1cm2大小若干片）置于装有pH6.8磷酸缓冲液的50ml烧杯中，使其下沉；
2、吸去pH6.8磷酸缓冲液，用1% TritonX-100处理20min；
3、吸去1% TritonX-100，用M-缓冲液洗三次，每次8min；
4、3%戊二醛固定30min；
5、pH6.8磷酸缓冲液洗三次，每次8min；
6、0.2%考马斯亮兰R250染色20min；
7、用蒸馏水洗1-2次，将内表皮细胞平铺子载玻片上，加盖玻片，于显微镜下观察。
五、实验作业：
1、绘制你所观察到的植物细胞骨架图象；
2、戊二醛、考马斯亮兰R250、TritonX-100是什么？在本实验中各起什么作用？
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