组织病理技术名解_组织病理学技术
组织病理技术名解由刀豆文库小编整理,希望给你工作、学习、生活带来方便,猜你可能喜欢“组织病理学技术”。
病理学:病理学是研究疾病发生发展规律的学科,主要的研究范围是疾病发生发展过程中组织、细胞代谢、功能及结构的变化。
取材:组织标本的选择即取材,取材的目的是正确的获取所需要的标本或标本的某一部位。
组织的固定:将各种组织浸入某些化学试剂内,使细胞内的物质能尽量保持其生活状态的形态结构和位置,叫做固定。
Carnoy液:固定胞浆和胞核,对染色体固定佳,显示DNA和RNA效果好.也常用于糖原和尼氏体的固定.不能保存脂质有防止酒精的硬化收缩作用,穿透力强,适用于外膜致密的组织
脱水:某些溶剂置换组织内水分的过程,能够使组织脱水的化学物质称为脱水剂。
透明:组织经酒精脱水后,还必须经过一个媒剂透明过程
浸蜡:经过透明的组织块,进一步移入熔化的石蜡内浸渍,称为浸蜡。用其他浸透剂(火棉胶,碳蜡,明胶等)渗入组织内部的过程称为浸透或透入
包埋:使用包埋剂将处理过的组织包于其中,使组织达到一定韧度和硬度,有利于切片。
组织芯片:又称组织微列阵,是将数十个、数百个、乃至上千个小的组织片整齐的排列在某一载体上(通常是载波片)而成的微缩组织切片。
石蜡切片:组织经石蜡包埋后制成的蜡块,用切片机制成切片的过程称为石蜡切片法。
HE染色(常规染色):使用苏木精hematoxlin和伊红eosin染色,主要用以显示各种组织、细胞的一般形态结构以及疾病过程中病变的发生、发展及修复的过程。
封固剂:使染色后的组织封固于载玻片与盖玻片 之间而不与空气直接接触,避免氧化褪色;折光率与玻片的折光率相似。
抗原修复:组织在制作过程中,由于化学试剂的作用封闭了抗原,又由于热的作用致使部分抗原的肽链发生扭曲,致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来,为了解决上述的问题,利用化学试剂和热的作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来的过程称为抗原修复。
抗原修复(Antigen retrieval,AR)技术:是指石蜡、冰冻、火棉胶、塑料切片免疫组织化学(IHC)前用胰蛋白酶、尿素、表面活性剂、微波缓冲液和金属盐等,通过机械的方法断开因福 尔马林固定的导致的抗原表位和不相关蛋白间的交联键,使被掩盖的抗原决定簇或变性的抗原重新暴露或抗原性得到一定程度的恢复,使抗体更好的渗透,与表位结 合。抗原修复能最大程度地恢复在制片等过程中损失的抗原性,使原来认为不能在石蜡切片上进行IHC的许多抗体获得了良好的染色结果,成为一种有效的补救措 施,AR-IHC已广泛应用于临床的研究中。
抗原:刺激机体发生免疫应答产生相应抗体或致敏淋巴细胞并能与之特异性结合的物质。
抗体:受抗原刺激后B淋巴细胞产生的与相应抗原反应的球蛋白
Envision法:EnVision法又称为ELPS法(enhance labeled polymer system),抗原—抗体反应结合后,第二抗体上标记有多聚化合物(葡聚糖)酶复合物(EnVision复合物),与第一抗体结合,进而由酶作用底物进行显色定位。EnVision复合物是利用一种多聚化合物将HRP或AKP和第二抗体(抗鼠或抗兔IgG)同时标记在一个多聚化合物上,即形成酶—多聚化合物—第二抗体巨大复合物。
PAP法(Peroxidase-Antiperoxidase Method):
一抗 + 二抗 + PAP复合物(HRP + 抗HRP抗体[与一抗统一种属])+ HRP底物显色
LAB法(Labelled Avidin-Biotin Method):
一抗 + 生物素标记二抗 + HRP标记抗生物素 + HRP底物显色
SP法(Streptavidin-Peroxidase Methed):
一抗 + 生物素标记二抗 + HRP标记链霉亲和素 + HRP底物显色
ABC法(Avidin-Biotin-peroxidase Complex Method):
一抗 + 生物素标记二抗 + ABC复合物(抗生物素 + HRP标记生物素)+ HRP底物显色
SABC法(Streptavidin-Biotin-peroxidase Complex Methed):
一抗 + 生物素标记二抗 + SABC复合物(链霉亲和素+ HRP标记生物素)+ HRP底物显色
非特异性染色non-specific staining:染色过程中出现的不属于特异性抗原抗体反应的着色(假阳性,背景着色)。
衬染(复染):免疫组化染色后加用其他染料复染,衬托组织形态结构,使形态与功能密切相关,利于结果分析。
阳性对照 positive control
用已知抗原阳性的标本与待检测标本同时免疫组化染色,结果阳性者。
阴性对照 negative control 用确认不含已知抗原的标本作对照,免疫组化染色结果阴性者。阴性对照还有
空白对照,替代对照,吸收对照,抑制实验等
自身对照:在同一标本切片上,靶抗原的阳性反应与其他无关结构或成分的阴性结果形成鲜明对照。
空白或替代对照:以缓冲液(如PBS)或与第一抗体同源的正常动物血清取代第一抗体,结果应为阴性。
吸收对照:用相应的纯化抗原(过量)中和吸收特异性第一抗体,使其结合点全部被外源性抗原结合,不能再与组织内的靶抗原反应,用这种吸收后的第一抗体作免疫组化染色,结果应为阴性。
抑制实验:待检标本因与未标记的特异性抗体反应而影响了与标记的特异性抗体结合,使染色结果明显减弱或转阴。
热修复:消除甲醛固定形成的蛋白分子的交联(共价键分子引力),削弱或打断钙离子化学键,恢复抗原分子的自然构象和抗原性。