杉木高温胁迫处理方案_高温中署应急处理方案

2020-02-28 其他范文 下载本文

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杉木高温胁迫处理方案

实验材料:选取由同一基因型植株高度为3-5cm杉木实生苗幼苗。处理组和对照组均分为六组,每组3瓶(每瓶3株),三个重复。

处理方法:

一、先进行预实验,记录并观察杉木幼苗每天的生长情况,确定其植株死亡的时间点,然后调整制定的方案的处理时间。

二、确定处理时间后,将处理组置于37℃、光周期8h / 16h(暗/光)、光照强度4000lx的光照培养箱中,以进行高温胁迫处理。处理时间分别为0h、24h(1天)、72h(3天)、120h(5天)、168h(7天),216h(待处理168h(7天)后立即转入正常培养条件23℃、光周期8h / 16h(暗/光)、光照强度4000lx进行恢复培养48h。每个时间点分别设置对照。每处理时间点取一部分叶片进行生理指标的测定,一部分叶片然后置于-80℃保存。

植株表型观察:对处理后不同的时间点前后的杉木幼苗进行整株长势,叶片的生长情况的拍照记录。处理过程中如果有明显卷曲、萎焉等症状,还可以对叶片的局部放大拍照。生理数据的测定:

1、丙二醛(MDA)含量的测定:

2、过氧化氢(H2O2)含量的测定:

3、脯氨酸(Pro)含量的测定:

4、可溶性蛋白含量的测定:

5、ABA含量的测定:

蛋白质的研究:通过双向电泳,鉴定高温处理后发生差异的蛋白点是否为热激蛋白。

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