手细菌检验规程_手细菌规程
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目的规范手细菌总数检验的操作方法,指导检验人员严格按程序操作,确保手细菌总数检验结果的正确,可靠。2 范围
适用于本公司所有洁净车间操作工手细菌总数的检查。3 职责
3.1 质管部门制定作业指导书,领导检验工作和结果审核。
3.2 检验室检验人员严格按本文件操作,对检验结果的正确性负责。4 检验依据
GB15980-1995《一次性使用医疗用品卫生标准》 5抽样方案.样本数量
每个星期在洁净车间随机找10个操作工进行采样。6 仪器检验试剂
压力蒸汽灭菌器
恒温培养箱
超净工作台
酒精灯
放大镜
培养皿
大豆酪蛋白琼脂培养基
试管
刻度吸管 7 培养基的制备
肉汤琼脂培养基:按说明书配制,40g加入1L水,加热至完全溶解,115℃蒸汽压力30min灭菌。0.9%NaCl试剂 8 试验前准备
将上述试管,1ml吸管(吸管用脱脂棉塞住顶端并用牛皮纸包卷好),培养皿(用牛皮纸包好),放进灭菌桶内,以0.1~0.15Mpa灭菌30min备用(也可用一次性使用无菌培养皿)。9 试验
被检人五指并拢,用浸有0.9%无菌氯化钠试液的棉签在右手指曲面,从指尖、甲沟至指根处往返涂抹10次后,将棉签放入10ml无菌氯化钠溶液中。将每个采样管震打80次,混匀,10倍递减稀释,对每个稀释度(取3个稀释度),分别取1ml放于培养皿中(每个稀释度倾注2块平板),再倾注15ml的大豆酪蛋白琼脂培养基,混匀,于37℃培养24h,观察结果。10 记数
一般以肉眼观察,必要时用放大镜。
菌数/每只手=平均菌数×稀释倍数
应≤300cfu/每只手 11 注意事项
10.1 严格按无菌操作,防止污染。10.2 注意菌液的均匀分散。
10.3 取样要准确,尽量防止试管使用中产生的误差。
10.4 取液接种于平皿后,应尽快倾注营养琼脂培养基,避免样液干于平皿上,影响结果的准确性。