转基因大豆制品半定量检测方法研究_转基因大豆制品

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转基因大豆制品半定量检测方法研究

转基因作物发展迅速，2004年总种植面积8100万公顷，增长率为20%。估计2010年将达到1.5亿公顷，并将有多达30个国家的1500万农民种植生物技术作物。

转基因作物在带来巨大经济效益、社会效益与环境效益的同时，也产生了许多认识和观念问题。各国政府纷纷制定相应的法律和法规，转基因的定性检测国内外已有很多报道。瑞典转基因检测方法即是检测35S启动子，欧盟则要求检测35S启动子和NOS终止子。随着各国转基因法律和法规越来越严格，定量检测显得日趋重要。Marc Vaïtilingom等用Real-Time PCR定量检测抗草甘膦大豆，能定量分析含转基因成分仅为0.01％的样品。实时PCR技术自动化程度高、快速、灵敏度极高，但所需仪器十分昂贵，检测费用也高，方法的标准化程度不高。本研究旨在利用普通PCR扩增，结合国内的实际，建立一套经济、简便的半定量检测方法。

定性检测了转基因大豆制品中插入的具有抗除草剂特性的CP4－EPSPS目的基因。用普通PCR扩增，以大豆凝集素（lectin）基因为内置标准，利用已知转基因成分标准含量样品与未知含量样品进行扩增对比。经聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染、成像，用凝胶分析软件（Quantity One 4.5）进行数据处理，从而确定未知样品转基因含量。

随着各国有关转基因成分(GMO)标签法的建立和不断完善，建立适合我国的转基因食品国家标准检测方法是刻不容缓的课题。本研究通过普通PCR与凝胶分析软件的结合，利用分辨率较高的聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术，建立了一套经济、简单可行的转基因成分半定量检测方法。

实践证明，该方法经济且具有较高的准确性。

关键词：转基因大豆 PCR检测 半定量检测