化学与人类生活论文要求_化学与人类生活论文
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《化学与人类生活》课程论文要求
1、在课程内容范围内自拟题目
2、字数2500以上
3、论文内容应与课程内容紧密结合,并应有自己的观点、体会等
4、格式:
题目
姓名
班级、学号 摘要
关键词(3至5个)正文
参考文献(若干篇,能有英文参考文献更好)。引文格式如下:
„大花细辛(Herba Asari Maximi)分布于广东、江西、湖南、湖北、四川、江苏、浙江。春、夏采收,洗净,晒干使用[1]。
„„„„„„„„„„„
中药材所含挥发性成分,组成非常复杂,是重要的药用有效成分。对中药挥发性成分的提取通常采取水蒸气蒸馏法和有机溶剂萃取法[4]。
……………………………………
参考文献
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参考文献著录格式:
期刊 [序号]作者.(外国人姓前名后,名缩写,省略缩写点“.”;3人以上只列3人,后加“等”字)题名[J](文献类型标志).期刊名(外文可缩写,省略缩写点“.”),年份,卷号(期号):起始页码(如期刊无卷号,则为:年份(期号):起始页码)如
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[5] 朱明华.仪器分析(第三版)[M].北京:高等教育出版社,1992:4-6.从金银花中提取绿原酸的工艺研究
符史良,钟杰平,李海霞1,谭志雄
112(1.广东海洋大学理学院,2.广东海洋大学现代生物化学实验中心,广东 湛江 524088)
摘 要:本文用不同浓度的乙醇从金银花中提取绿原酸,以正交实验进行优化工艺研究,采用紫外分光光度法测定提取液中绿原酸的含量,探讨了乙醇浓度、乙醇倍量、回流时间、pH值、浸泡温度对绿原酸含量的影响。实验结果表明,最佳的工艺条件是:10倍量50%乙醇为浸提剂,浸泡温度为70℃,pH值=7,回流时间为1 h,提取次数为2次。关键词:金银花;绿原酸;正交实验
中图分类号:
文章标识码:
文章编号:
Study on Extraction Proce of Chlorogenic Acid
from Flos Lonicerae
FU Shi-liang,ZHONG Jie-ping , LI Hai-xia , TAN Zhi-xiong , Center, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China)(1 Science College, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China;2.Modern Biochemistry Experiment
Abstract: The extraction proce of Chlorogenic acid from Flos Lonicerae was studied with different concentrations of ethanol, the procees were then optimized by orthogonal test, and Chlorogenic acid was determined by UV.The effects of concentration of ethanol, folds of ethanol, refluxing time, pH and extracting temperature on Chlorogenic acid content had been studied.The result showed that the optimum extraction technology of Chlorogenic acid from Flos Lonicerae includes the extraction conditions of 10 folds of 50% ethanol , dip in 70℃ water , pH=7 , refluxing for 2 times and 1 h each time.Key words: Flos Lonicerae;Chlorogenic acid;orthogonal test
金银花(Flos Lonicerae)是忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾,具有清热解毒、凉散风热的功效[1]。药理研究表明,金银花具有抗病原微生物、抗炎、抗生育、解热、保肝、止血、降血脂、抗氧化、免疫调节等作用,并且具有明确的抑制血小板聚集的作用[2]。临床主要用于治疗多种感染、各种炎症、高热症、高血脂症、肿瘤放疗等。金,银花对多种致病菌均有一定的抑制作用,是一种广谱抗菌中药[34]。金银花的主要有效成分之一为绿原酸[5]。绿原酸(Chlorogenic acid)是咖啡酸(Caffeic acid)与奎宁酸(Quinic acid,即1-羟基六氢没食子酸)的酯,分子中具有羧基、酯键以及多元醇和多酚结构,是一种苯丙素类化合物,化学名为3-O-咖啡酰奎宁酸(3-O-caffeoyl quinic acid),结构式如[6]图1所示。绿原酸的药用历史悠久,具有抗菌、抗病毒等作用,对消化、血液系统和生殖系统疾病均有疗效[7]。近年,绿原酸及其衍生物被确认是大鼠肝微粒体中葡萄糖-6-磷酸位移酶(Glc-6-P-translocase)的特效性抑制剂,显示出其在治疗糖尿病方面的良好前景[8]。绿原酸也是某些中药制剂质量控制的重要指标[5]。
绿原酸分子中含有羧基及多个羟基,易溶于水、乙醇和甲醇。金银花提取物中绿原酸在有机溶剂中比较稳定,在乙醇中比在甲醇中更稳定,提示金银花提取物供试液宜用乙醇配制,绿原酸对照品也最好用乙醇配制,更利于保存[9]。
本文采用不同浓度的乙醇即稀醇法提取金银花中的绿原酸,以正交实验优选提取条件,用紫外分光光度法测定提取物中绿原酸的含量,并对影响绿原酸含量的多种因素进行探讨,得出了最佳的提取工艺条件。
HOOHOHOHOHCOOHO-COCH=CH 图1 绿原酸结构式
Fig.1 The structure of Chlorogenic acid
1.材 料 与 方 法
1.1 实验材料、试剂与仪器
材料:金银花,购于广东湛江市天马药房。
试剂:分析纯无水乙醇,广州化学试剂二厂;蒸馏水,自制。绿原酸标准品,由中国药品生物制品检定所提供。
仪器:UV-2102 PCS型紫外可见分光光度计,龙尼柯(上海)仪器有限公司;FA-1104电子天平,上海天平仪器厂;SH2-D(Ⅲ)循环式真空泵,巩义市英峪予华仪器厂。1.2 实验方法
设计正交试验方案,用不同浓度的乙醇提取金银花中的绿原酸。考虑的影响因素有:乙醇浓度(质量分数)、乙醇用量、回流时间、pH值、浸泡温度,根据实验要求,选定各因素的取值范围,设计成4水平5因素的水平、因素表,具体见表1。
表1 水平、因素表
Table 1 The table of levels and factors
水平\因素
乙醇浓度(%)
乙醇倍量
回流时间(h)
pH值
浸泡温度(℃)
A B C D E 1 40
1.0
2 50
1.5
3 60
2.0
4
2.5
综合考虑提取效果和经济效益,固定提取次数为二次,按上述正交试验方案进行实验。将干金银花剪碎,称取20.0g,加乙醇,调节pH值,水浴浸泡3h,回流,过滤,得滤液;将滤渣加乙醇,调节pH值,水浴浸泡2h,回流,过滤。合并二次滤液,低温处理,减压抽滤,回收乙醇,浓缩得粘稠状提取物。
准确称取绿原酸标准样品10mg,用无水乙醇定容至100mL,分别准确量取0、1、2、3、4、5、6mL于7个25mL容量瓶中,用无水乙醇定容。用UV-2102 PCS型紫外可见分光光度计,在329nm处测定吸光度A,并以吸光度A为纵坐标,绿原酸浓度C为横坐标绘制标准曲线。准确称量提取物,用无水乙醇稀释至适当浓度,在329nm处测定吸光度A,查标准曲线,[10,11,12]计算样品中绿原酸的百分含量。所得数据列于表2。
5表2 L16(4)水平正交试验结果
5Table 2 Results of L16(4)level orthogonal test
编号 乙醇浓度 乙醇倍量 回流时间
pH值
浸泡温度
吸光度
绿原酸的含量(%)(h)(℃)(A)(%)A B C D E 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
8 1.0 4 50 1.759 8.59 40 10 1.5 5 60 1.752 8.56 40 12 2.0 6 70 1.158 5.66 40 14 2.5 7 80 1.778 8.69 50 8 1.5 6 80 1.643 8.03 50 10 1.0 7 70 1.836 8.97 50 12 2.5 4 60 0.914 4.47 50 14 2.0 5 50 1.791 8.75 60 8 2.0 7 60 1.403 6.86 60 10 2.5 6 50 1.775 8.67 60 12 1.0 5 80 1.503 7.34 60 14 1.5 4 70 1.378 6.73 70 8 2.5 5 70 1.293 6.32 70 10 2.0 4 80 1.797 8.78 70 12 1.5 7 50 1.444 7.06 70 14 1.0 6 60 1.771 8.65
2.结果与讨论
由表2数据对各个水平因素进行极差分析,得出极差分析表3
表3 极差分析表
Table 3 The range analysis of level factors 因素 水平 绿原酸的含量(平均值)K 极差值R
7.88 乙醇浓度(%)
7.56
7.40
7.707.45 乙醇倍量 10 8.75 12 6.13 14 8.21 1.0 8.39 回流时间(h)1.5 7.60 2.0 7.50 2.5 7.04
7.14 pH值
7.747.75 7 7.90 50 8.27 浸泡温度(℃)60 7.14 70 6.92 80 8.21
0.48
2.62
1.35
0.76
1.35 由极差分析表3可知,在所设计的实验方案范围内,用稀醇法从金银花提取绿原酸,其影响因素大小为:乙醇倍量>浸泡温度=回流时间>pH值>乙醇浓度。最佳的提取工艺条件为:10倍量50%乙醇为浸提剂,浸泡温度为70℃,pH值=7,回流时间为1 h,提取次数为2次,即编号6:A2 B2 C1 D4 E3。此条件下,绿原酸的含量最高,为8.97%。2.1 乙醇用量的影响
乙醇用量对绿原酸的提取率影响最大。随着乙醇用量增加,绿原酸的提取率逐渐增加,当乙醇用量增加至金银花重量的10倍时,绿原酸的提取率逐渐达到最大值。乙醇用量少,对绿原酸的溶解、萃取不充分,因而绿原酸的提取率较低。但乙醇用量大于10倍量时,绿原酸的提取率反而下降。可能的原因是,醇用量过大,伴随吸附和包夹,致使绿原酸有不同程度的损失。因此,选择适当的乙醇用量,既能得到理想的提取率,又可避免试剂的浪费。2.2 浸泡温度的影响
浸泡温度对绿原酸的提取率有较大影响。绿原酸的溶解度与温度有关。浸泡温度过低,不利于绿原酸的浸出,较高的浸泡温度有利于绿原酸的溶解提取,但温度过高会加快绿原酸的分解速度,影响绿原酸的提取率,也会增加杂质的溶出量。从正交实验结果可知,浸泡温度控制在70℃左右为宜。2.3 回流时间的影响
回流时间对绿原酸的提取率也有较大影响。实验结果表明,当回流时间为1 h时,提取效果最好。随着回流时间延长,提取率不断下降。回流前已对金银花进行3h的热浸泡,相当部分的绿原酸已在浸泡时被溶出,再进行1 h的回流浸提,绝大多数的绿原酸已被萃取。再增加回流时间,无法使绿原酸的含量增多,反而将使绿原酸分解的几率增大,还可能使提取物中的杂质增加,造成绿原酸提取率降低。缩短回流时间,既能获得较好的提取率,又能节省时间,降低成本。2.4 pH值的影响
pH值对绿原酸的提取率有一定影响。文献认为绿原酸在碱性条件下易降解,降解产物[9]为咖啡酸和有关物质。本实验结果表明,在pH值=7的中性条件下,提取率最大。理由是,在较高的温度下提取,其过程绿原酸将会有部分分解或发生一定的水解、醇解反应。碱性介质和酸性介质都将有利于绿原酸的分解或反应,因而,在中性条件下提取最好。在中性条件下提取,还具有操作简便、安全,成本低等优点。2.5 乙醇浓度的影响
本实验中,乙醇浓度对绿原酸的提取率影响最小,质量百分比为50时提取率最大。由于乙醇本身的特性,药材组织内的一些绿原酸不易被高浓度的乙醇提取,因为不同浓度的乙醇溶液透过细胞壁和解吸有效物质的能力是不同的,通常,50%乙醇溶液解吸效果最好。解吸效果越好,提取率越高。
实验表明,10倍量的50%乙醇,中性条件下70℃浸泡,回流1 h,提取2次,得出最好的提取率,为最佳的提取工艺条件。
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