生物化学[第十五章常用生物化学实验技术]课程复习_生物化学实验复习
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第十五章常用生物化学实验技术
生命科学的研究首先是要分离和纯化目标物质,才能进行后续的研究。生物大分子的分离和纯化的往往是利用大分子各种特性的差异。层析和电泳就是我们常用的分离和提纯生物大分子的实验技术。层析法是一种基于被分离物质的物理、化学及生物学特性的不同,使它们在某种基质中移动速度不同而进行分离和分析的方法。例如我们利用物质在溶解度、吸附能力、立体化学特性及分子的大小、带电情况及离子交换、亲和力的大小及特异的生物学反应等方面的差异,使其在流动相与固定相之间的分配系数(或称分配常数)不同,达到彼此分离的目的。.电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团,它们在某个特定的pH下可以带正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。根据研究的目标以及目标特性的不同,我们在层析和电泳技术原理的基础上都衍生和发展各种新的更加方便的实验技术。除了层析和电泳的技术之外,常用的生化实验技术还包括离心、透析、过滤等,还有基因工程的技术,如PCR、分子杂交等等,用来研究生物大分子的物理、化学以及生物学的功能,帮助我们解释生命的秘密。
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