猪细小病毒病的诊断与防制_猪细小病毒病
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猪细小病毒病的诊断与防制
吕建强陈焕春
猪细小病毒病是由猪细小病毒（PPV）引起的猪繁殖障碍性疾病，该病原属于细胞病毒属，呈典型的二十面立体对称结构，无囊膜，直径约为20~30nm，基因组为单链线状NDA，衣壳由32个壳粒组成，一般含有三种结构蛋白（VP1，VP2，VP3）。PPV对外界理化因素具有很强的抵抗力，56℃ 4h处理，几乎不降低其感染性，37℃ 7日，56℃ 2日也不能完全使其丧失感染性，但是80℃ 5分钟可使其灭活。对酸碱、脂溶剂及许多蛋白酶有抵抗力。PPV适合在生长旺盛并处于有丝分裂过程中的细胞内增殖，体外培养时，它可在细胞生长的晚期或早期大量增殖。妊娠初期（怀孕第1-70天）是病毒增殖的最佳时期，一般认为，PPV主要侵袭增殖快速的组织器官，故病理变化主要局限于血管上皮，小脑外胚层，胎儿组织和肿瘤等。
自1967年，英国学者Cartwright首次报道后，世界各地先后有关于此病的报导，并有大规模爆发，我国学者1980年初陆续分离到PPV。各品系和年龄的猪对PPV均敏感，可水平或垂直传播。在猪群中，主要通过配种，接触分泌物排泄物和污染的器物传播；受感染的妊娠母猪在病毒学期间，可通过胎盘感染胎儿，并可在子宫内传播，这对生产危害尤为突出。据血清学调查，该病已在世界范围内流行，猪场阳性率极高，很难找到阴性猪场。猪的阳性率，英国为19-56%，德国屠宰猪为54%，澳大利亚为52%，美国为57%，我国的阳性率极高。据报道，英国用本病造成的经济损失估计约为1500万英镑，日本由PPV造成的经济损失为6000万日元，而PPV给我国造成的经济损失为几十亿元人民币。由此可见，PPV感染导致的繁殖障碍给养猪业造成了严重的经济损失。
本病引起的繁殖障碍主要发生于7-9月份，且主要是春夏配种的初妊娠母猪，一般呈地方性或散发性流行。在新建猪场和初次污染的猪场往往呈流行性的，发病猪场持续几年甚至十几年不断发生，孕猪早期感染时，胎猪的死亡率高达80-100%，PPV感染后1-6天，可产生病毒血症，1-2周后开始排毒，血清中H2抗体高达1：1024以上，而且下降缓慢，可持续数年。生仔猪吃初乳后，可获得高水平的母源抗体，随着日龄增长，母源抗体逐渐下降，平均持续5个月左右，因此后备母猪就成为易感猪，此时应该注射PPV疫苗进行免疫。
成年猪即使感染PPV，几乎不表现临床症状，人工感染的仔猪，可出现肺炎，食欲不振，呕吐、下痢等，但缺乏再现性。怀孕早期的母猪一旦感染PPV后，可产生病毒血症，病毒随血液感染胎盘，产生大部分死胎，木乃伊胎返情或弱仔，而且母猪本身并未出现明显临床症状。妊娠母猪随感染时期不同，表现也不同。在妊娠早期（10-30），可引起胚胎死亡，初吸收后引起产仔数减少；妊娠中期
（40-60天），引起死胎，木乃伊胎，异常胎儿等，一般不发生流产，死亡胎儿多在分娩时产出；妊娠70天感染，可造成胎盘炎而发生流产；妊娠70天以上感染的母猪，多能正常产活仔，但仔猪瘦弱易死亡。患病母猪易出现发情不正常，久配不孕，空怀等现象。病理变化主要表现在妊娠母猪和妊娠70天以前感染的胎儿。内眼可见，母猪子宫内膜有轻度炎症或胎盘钙化，胎儿被溶解，吸收；被感染的胎儿可看到充血，出血水肿，脱水，黑化畸形等现象。镜检可见，子宫上皮组织和固有层有局部性炎性细胞浸润，感染胎儿可见细胞坏死，炎症和核内包涵体，死产和流产的仔猪有脑脊髓炎变化，以血管套变化为主。
如果在猪场同时出现许多母猪，尤其是初产母猪发生流产、死产、死胎、木乃伊胎等，其中以木乃伊胎为主，而经产母猪不表现任何临床症状，同时有证据表明是传染性疾病时应首先考虑PPV病，但是确诊仍需进行实验室诊断。自首次报道PPV病以来，有关该病诊断方法的研究报告较多，从最初的病毒分离鉴定，到血凝及血凝抑制试验、酶联免疫吸附试验等免疫学方法，直到核酸探针、聚合酶链式反应等分子生物学技术应用到PPV病的诊断中。不同诊断方法根据检测的对象，大体可分为病原学检测和血清学检测。病毒分离和鉴定用于诊断PPV感染的最大优点是结果准确可靠，可以作为最后确诊。用于分离PPV的病料，一般为流产或死产胎儿的脑、肾、肝、肺、睾丸、胎盘及肠系膜淋巴结等，其中以肠系膜淋巴结和肝脏的分离率最高。但是该方法费时费力，不仅需要一定的技术条件和设备，而且也受胎儿死亡时间的限制。PCR诊断技术已用于临床检测PPV，大大提高了诊断的敏感性和特异性，可其费用较高、需要特定的仪器。目前，国内外广泛使用的还是HI试验检测PPV血清抗体，该方法简便易行、检出率高，可用于PPV病的流行病学调查和猪群免疫水平的监测。此外，本实验室研制的乳胶凝集试验与HI相比，具有简便、快速、经济等优点，尤其适合于临床上的现场检测，被许多学者誉为“傻瓜技术”，因此具有良好的推广应用前景。该方法的不足之处在于它所检测的抗体主要是IgM，因此只能用于疾病的定性诊断，不能进行血清抗体滴度的监测。而其它的多种诊断方法虽然有一定的应用前景，但是还没有广泛使用。
PRV感染引起的繁殖障碍尚无有效治疗法，加强管理和有效免疫接种是防制该病的关键。由外地引猪时，一定要严格隔离措施，防止将带毒猪引入无该病的猪场，坚持自繁自养的原则，对血清学阴性的母猪和种公猪进行疫苗接种，待母猪获得主动免疫后再行配种，老疫区免疫接种侧重于初产母猪。由于高滴度母源抗体主动免疫的形成会有影响，一般超过5-6周龄的初产母猪，其母源抗体基本消失，可以进行疫苗接种。在不急于配种的情况下，可延期进行免疫，即后备母猪超过7月龄时注射疫苗，然后进行配种会取得满意的效果。猪自然感染PPV
后，可以产生高滴度的抗体并持续存在，使母猪获得良好的保护。经产母猪由于具有高水平抗体，一般不会再次发生繁殖障碍但是也有例外。在早期的研究报告中，PPV疫苗的免疫均为间隔2-3周的二次免疫注射，随着疫苗生产工艺的改进，许多学者发现一次免疫注射也能达到良好的效果，免疫后的后备母猪在妊娠40d时用强毒攻击，可以获得完全保护。我们认为，对母源抗体水平不确定的猪场，一般建议，在配种前一个月免疫接种合格的PPV疫苗，过半个月后再次免疫。尽管已有多株弱毒疫苗在临床上应用，但是由于PPV强毒株的大量存在，人们对病毒重组及弱毒返强的担心，一直使弱毒疫苗的应用受到一定限制，生产中大多使用灭活疫苗。目前，在感染猪群中应用PPV高免血清进行治疗毫无实际意义。
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