SYSMEX XE2100血液分析仪白细胞分类的应用评价_五分类血液细胞分析仪
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SYSMEX XE-2100血液分析仪白细胞分类的应用评价
凌励
沈茜 周道银1`
王学 郑晓玉 郁 超
1`1`21 摘要:目的 评价Sysmex XE-2100血液分析仪白细胞分类功能的应用。方法 选择6份样本各测5次,观察其批内精密度;对1100例已测样本,进行血片复检,评价其报警系统的性能。结果 XE-2100血液分析仪白细胞分类具有很高精密度,其报警系统的特异性94.8%,灵敏度100%,总有效率95.5%。结论 XE-2100白细胞分类及报警系统的功能良好,符合临床应用需求。
关键词:XE-2100血液分析仪;白细胞分类;报警系统
Sysmex XE-2100血液分析仪是一台五分类血液分析仪,除采用传统的电阻抗法和射频法外,还用流式细胞技术,结合特殊化学试剂及荧光染料作周围血五种白细胞的分类;并可分析出原始和幼稚粒细胞、有核红细胞。我们对用该仪器检测的1100例标本的白细胞分类结果进行了分析评价,现将结果报告如下。
材料与方法
1.仪器与试剂 XE-2100血液分析仪及配套试剂。2.样本 K2EDTA抗凝静脉血来自长海医院血常规标本。3.白细胞分类原理
3.1 “DIFF”通道 将白细胞分为除嗜碱性粒细胞外的中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞。其纵座标(Y轴)表示侧向荧光强度,反映亚甲基染料对DNA/RNA的染色强度,横座标(X轴)表示侧向散射光强度,反映细胞的内容物。
3.2 “WBC/BASO”通道 用于检测嗜碱性粒细胞及计数白细胞。Y轴表示前向散射光,反映细胞体积,X轴表示侧向散射光。
3.3 “IMI”通道 用于检测未成熟粒细胞。采用直流电(DC)与射频(RF)联合检测的方法,RF测细胞核的大小及密度为Y轴,DC测细胞体积和数量为X轴,在IMI散射图上,不同的未成熟粒细胞占据不同的位置。
3.4白细胞分类报警系统 仪器为每个可疑警号(Q-flag)设置一个直方图来表达“Yes/No”可疑警号,仪器将临界值设在100,若参数的可疑警号值低于100则定义为阴性,若在100与300(最大值)之间则定义为阳性,可疑警号的数值反映了可疑警号的可信度。可疑警号的类型及含义见表1。
表1.可疑警号的类型及含义 1[1][1]
[1] 1.第二军医大学长海医院实验诊断科,上海200433,2.江苏大学实习生 类
型
WBC-A-S? Blasts? Imm Gran? Left Shift? Atypical Lymph? Abn Lymph /L-Blasts?
白细胞散射图异常? 出现原始粒细胞?
含
义
出现早幼粒、中幼粒、晚幼粒细胞? 出现中性杆状核细胞? 出现异形淋巴细胞或浆细胞?
出现淋巴细胞异常或原始淋巴细胞增多? 4.方法
4.1批内精密度(重复性)对白细胞计数及分类的重复性进行评估。采用5个异常及1个正常样本共6个样本,每个样本分别进行5到6次闭盖模式进样检测。
4.2白细胞报警系统检测异常细胞能力的评估 我们检测和统计1100份标本中出现的各种可疑警号(有部分标本同时出现两个以上可疑警号),并对所有样本进行血片分类,以评价该仪器白细胞分类功能及报警系统检测异常细胞的能力。
结
果
1.批内精密度 所分析参数的结果见表2,数值极低的结果CV值较高,总体精密度很好。
表2.XE-2100白细胞计数及分类批内精密度
项目
WBC(×10/L)NEUT(%)LYMPH(%)MONO(%)EOS(%)BASO(%)
9数据范围 1.98-48.02 3.82-89.12
6.70-94.92
0.84-6.12 0.02-4.52 0.08-1.10
CV%变化范围 1.23-4.00
0.22-2.87 0.20-4.60 3.83-8.75 8.54-23.61 23.57-55.90
2.白细胞报警系统对异常细胞检测能力的评估
2.1 异常细胞检测能力评估 检测1100例标本,出现可疑警号的样本为210例,占19.1%。对210例阳性样本及890例阴性标本进行显微镜下形态学分类,以评估白细胞报警系统异常细胞检测能力。890例阴性标本的血涂片经显微镜复检,均未查见异常细胞;210例阳性标本的血涂片经显微镜复检,161例查见相应的异常细胞,49例未查见异常细胞。该仪器检测灵敏度为100%,阴性预示值为100%,阳性预示值为76.7%,特异性为94.8%,白细胞可疑报警系统的总有效率为95.5%。
2.2 可疑警号出现的次数及相关病例分析 210例出现可疑警号的样本中共出现可疑警号259个,各可疑警号出现的次数及其手工复检阳性结果见表3。表3.各可疑警号出现的次数及其假阳性率
可疑警号出现次数
*WBC-A-S11 0
Blasts 63 54 14.1
Imm Gran 134 113 15.7
Left Shift 28 26 7.1
Atypical Lymph 6 6 0
Abn Lym /L--Blast 17 12 29.4
总计
259 222 14.3 镜检阳性次数
假阳性率(%)
*镜检阳性: 指检测出相应的异常细胞
在11例出现“白细胞散射图异常” 警号的样本中,同时出现“原始细胞”、“幼稚粒细胞”警号,此时仪器不报分类结果,其中4例为急性粒细胞白血病,2例为急性单核细胞白血病,1例为急性粒单细胞白血病,2例为慢性粒细胞白血病,2例为肿瘤患者化疗后使用促粒素,外周血片分类发现前7例中,原始粒细胞均在50%以上,后4例原始粒细胞10%-20% 之间。在单独出现“幼稚粒细胞”或与“核象左移”同时出现的病例中,以术后、感染、失血、大面积烧伤、晚期肿瘤、肿瘤患者化疗后使用促粒素以及慢粒等为多见。在出现异淋警号的6例样本中, 外周血片均发现异淋,3例为儿科病毒感染患者,3例为肝炎患者。出现“淋巴细胞异常或原始淋巴细胞增多”警号的17例样本中,有7例为新生儿或幼儿,淋巴细胞占70%以上,有5例为急性淋巴细胞白血病,5例为淋巴瘤白血病,后10例外周血片中原始淋巴细胞均在70%以上。
讨
论
XE-2100采用半导体激光照射被检细胞,依据每个细胞产生的三种信号来分辨细胞,前向散射光反映细胞的体积,侧向散射光反映细胞内容物,如核和颗粒,侧向荧光反映细胞内脱氧核糖核酸和核糖核酸的含量,因而保证了白细胞分类的质量,我们的研究结果显示,XE-2100白细胞计数及分类计数具有很高的精密度。
在“IMI”通道内,该仪器利用成熟粒细胞膜表面含较多量的脂质及较少量的蛋白质而幼稚粒细胞膜表面则相反的原理,检测时在IMI通道中加入含聚乙二醇次乙基团和硫化氨基酸的表面活性剂以破坏细胞膜,导致成熟粒细胞膜破坏而幼稚粒细胞膜部分受损,从而使聚乙二醇次乙基团和硫化氨基酸进入幼稚粒细胞与细胞膜和细胞内容物结合,不同的幼稚粒细胞对试剂的作用有所不同;再用直流电法测量细胞的大小,而射频则透入细胞内,测量细胞核的大小及核与胞浆的密度,因而在以射频信号为纵轴,直流电信号为横轴的“IMI”散射图上,不同细胞体积和核的密度及大小的细胞占据的位置不同。XE-2100独特的幼稚粒细胞通道(IMI)和白细胞分类的报警系统在血常规工作中,起着极其重要的作用,我们的研究结果显示,出现白细胞可疑警号标本的概率为19.0%,其特异性为94.5%,灵敏度为100%,[1]总有效率为95.5%,可疑警号的假阳性率为14.3%,从而使复片工作的针对性明显增强,提高了血常规工作的效率,保证了血常规检测的快速和准确;
因此我们认为,XE-2100是一台具有独特而完美的设计理念、分析软件功能强大、技术性能优良、操作简便的血液分析仪。
参考文献
1.R.Herklotz, A.R.Huber :Precision and accuracy of the leukocyte differential on the Sysmex XE-2100.Sysmex J Int, 11:8-21,2001.2.H.Inoue: Overview of automated hematology analyzer XE-2100.Sysmex J Int, 9:58-64,1999.