Sysmex XS 500i血液分析仪作业指导书_分析仪器作业指导书

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Sysmex XS-500i血液分析仪作业指导书

Sysmex Automated Hematology Analyzer(XS 500i)血细胞分析仪是用于检测血细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量和白细胞分类的仪器。检测血液中血细胞数量的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。

1、检验目的

Sysmex Automated Hematology Analyzer(XS 500i)血细胞分析仪是用于检测血细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量和白细胞分类的仪器。检测血液中血细胞数量的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。

2、原理

2.1 XS 500i采用一束半导体激光照射标本，并依据每个细胞产生的三种信号来相互区分，即前向散射光，侧向射散光和侧向光和侧向荧光。前向散射光反映细胞体积，侧向散射光反映细胞内涵物，如核和颗粒，侧向荧光反映细胞脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)含量。

2.2． DIFF通道：表面活性剂可完全溶解红细胞和血小板，部分溶解白细胞。第2种试剂使核酸染上荧光染料。XS 500i的DIFF通道可将白细胞分成5类。在STROMATOLYSER-4DL试剂中的表面活性剂可溶解或破坏红细胞和血小板，并在白细胞膜上打出小孔。在STROMATOLYSER-4DS试剂中的聚次甲基染料可进入破损白细胞，与核酸和细胞器结合，经波长633nm的激光照射，所产生荧光强度与细胞核酸含量成一定比例。在STROMATOLYSER-4DL试剂中的有机酸能与嗜酸性颗粒特异结合，根据侧向散射光信号强度，能提高嗜酸性粒细胞从中性粒细胞区分出来能力。

3、仪器

SYSMEX XS-500i自动血液分析仪

4、试剂：

4.1 稀释液：

CELLPACK(PK-30L)

氯化钠：

6.38g/L

硼酸：

1.0g/L

四硼酸钠

0.2g/L

EDTA-2K： 0.2g/L

4.2 Hb溶血素：

SULFOLYSER(SLS-210A)

月桂洗硫酸钠： 1.7g/L

4.3 STORMATOLYSER 4DL(FFD-200A)：

非离子表面活性剂：0.18%

有机季铵盐：

0.08%

4.4 WBC分类染液： STORMATOLYSER 4DS(FFS-800A)

聚次甲基染料：

0.002%

甲醇：

3.0%

1,2-亚乙基二醇：

96.9%

5.操作步骤：

5.1．打开电脑

5.2．双击“IPU”图标，出现IPU窗口和登陆对话框。输入用户名和密码。点击确认进入IPU。

5.3 检查废液是否已满，并倒空。打开主机电源，IPU与主机通信连接

5.4．主机初始化，然后做本底。

5.5 本底通过后，主机指示灯变绿，表示仪器处于待机状态，可以开始检测质控标本了。

5.6．质控检测：点击“手动”按钮，出现“手工样本号”对话框，在“手工样本号”对话框再点击“质控”按钮，出现“选择质控文件”对话框，选择好质控文件后，点击确认打开所选质控文件，混匀质控标本，按“开始”键开始分析质控样本，分析完后跳出质控样本分析结果，观察结果是否在控，若在控按“接受”按钮退出，开始检测病人样本，若失控按“取消”退出，查找原因，继续检测质控样本，直到质控结果在控。

5.7．样本分析：点击“手动”按钮，出现“手工样本号”对话框，在“手工样本号”对话框输入样本号，选择分析模式“CBC+DIFF”，样本预稀释模式“是”或“否”。点击确认，混匀样本，按“开始”键开始分析样本。分析结束后在“浏览器”下的“主屏”界面，观看结果、直方图和散点图，判断是否需要复片。

5.8．关机：双击“菜单”下的“关机”按钮，跳出“关机”对话框，点击“执行”按钮，主机自动冲洗2分钟，之后提示关闭主机电源，然后关IPU窗口退出程序，最后关闭电脑。

5.9仪器维护：

5.9.1.每日维护：每天关机自动清洗，如24小时待机，则执行一次“菜单”下的“自动清洗”。

5.9.2．每周维护：在“控制器”“保养”下执行排空废液，堵孔去除，去除气泡。

5.9.3．每月维护：每月或1200次分析之后开展一次每月维护，在“控制器”“保养”“每月清洗”下执行，同时执行清洗废液瓶。

6.参考范围：

6.1.1.白细胞(WBC)计数：

成人(4 –10)×109/L

儿童(5-12)×109/L

新生儿(15-20)×109/L 6.1.2.白细胞分类(成人)： 中性粒细胞（50-70）%

淋巴细胞（20-40）%

嗜酸性粒细胞（0.5-5）%

嗜碱性粒细胞（0-1）%

单核细胞（3-8）% 6.2．红细胞(RBC)：

男(4-5.5)×1012/L

女(3.5-5)×1012/L

新生儿(6-7)×1012/L

6.3 血红蛋白(HGB)：

男（120-160）g/L

女（110-150）g/L

新生儿（170-200）g/L

6.4．血小板(PLT)：

(100-300)×109/L

6.5．血球压积(HCT)：

男 0.42-0.49

女 0.37-0.43

6.6．平均红细胞体积(MCV)：

（86-100）fl 6.7．平均红细胞血红蛋白含量(MCH)：

（26-31）pg

6.8．平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)：

（310-370）g/L 6.9．红细胞体积分布宽度变异系数（RDW-CV）：

（11.6-14.0）%；

6.10．红细胞体积分布宽度标准差（RDW-SD）：

（39.0-46.0）fL。

6.11．血小板体积分布宽度（PDW）：

（15.5-18.1）%

6.12．平均血小板体积（MPV）：

(9.4-12.5)fl；

6.13．大血小板比率（P-LCR）：

(13-43)％。

7.临床意义：

7.1．白细胞

7.1.1.白细胞计数

7.1.1.1 生理性增加

新生儿、运动、饭后、冷水浴后、疼痛、月经期、受寒、妊娠、分娩、阵发性心动过速、阳光或紫外光照射、抽搐、恶心、呕吐、麻醉等。

7.1.1.2.病理性增加

类白血病、白血病、急性化脓性细菌感染、急性溶血、急性失血、单核细胞增多症、淋巴细胞增多症、真性红细胞增多症、腮腺炎、病毒性肝炎、淋巴瘤、组织坏死、手术后、肿瘤转移、药物中毒、代谢性酸中毒、过敏等。

7.1.1.3.减少

伤寒、副伤寒、斑疹伤寒、兔热病、布鲁杆菌热、流感、麻疹、风疹、革登热、传染性肝炎（亦可增多）、疟疾、过敏性休克、系统性红斑狼疮、粟粒性结核、败学症、重症细菌感染、恶液质、放射治疗、肿瘤化疗。恶性贫血、非白细胞性贫血、再生障碍性贫血、脾功能亢进、戈谢病、Felty综合症、Che^diak-Higashi综合症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。

7.1.2白细胞分类计数：见下述各种白细胞增多、减少的临床意义

中性粒细胞（N）

1）生理性N增多：饱餐、激动、剧烈运动、高温、严寒可使N暂时性增高、新生儿、月经期、妊娠5个月以上可增高，生理性增多都是—过性的，不伴有白细胞质量变化 2）病理性中性粒细胞增高：

原因很多，大致归为反应性增多和异常增生性增多两大类：反应性增多是机体对各种病因刺激的应激反应，动员骨髓贮存池中的粒C释放或边缘池粒C进入血循环。因此，增多的粒C大多为成熟的分叶核粒C或较成熟的杆状核粒C，而异常增生性增多为造血组织中原始或幼稚粒C大量增生，释放至外周血中的主要是病理性粒C。④急性失血，可能与大出血所致的缺氧和机体的应激反应，动员骨髓贮存池中的血细胞释放有关。⑤急性中毒

⑥恶性肿瘤

非造血系统恶性肿瘤有时可出现持续性WBC增高，以N为主，可能的机制为： a.肿瘤组织坏死的分解产物刺激骨髓中的粒细胞释放

b.某些肿瘤如肝Ca、肾Ca等肿瘤细胞可产生促粒细胞生成因子 c.恶性肿瘤骨髓转移破坏骨髓对粒细胞释放的调控作用。

异常增生性增多：见于粒C白血病如AML、CML，骨髓增殖性疾病。中性粒细胞减少： ①感染性疾病

病毒感染：流感、麻诊、风诊、肝炎；细菌：伤寒，严重的细菌感染 年老：慢性消耗疾病或晚期恶性肿瘤伴感染→预后差 ②血液系统疾病

非白血性白血病

恶性贫血

③物理

化学因素、放射线、核素、毒物、药物 ④单核-巨噬C系统功能亢进，脾亢 ⑤其它

过敏性休克

淋巴细胞 增高：

生理性增高：儿童，出生4-6天的可达50%，4-6岁后逐渐减低

病理性增高：百日咳、传染性单核细胞增多症、淋巴细胞性白血病、传染淋巴细胞增多症、病毒性肝炎、弓形虫病

减低：

急性感染、粟粒性结核、晚期肿瘤、艾滋病、伴T淋巴细胞减少的免性缺陷

单核细胞

增高：

单核细胞性白血病、系统性红斑狼疮、亚急性细菌性心内膜炎、活动性结核、急性感染恢复期、原虫感染

减低：

使用皮质类固醇激素、再生障碍性

贫血、多毛细胞白血病

嗜碱性粒细胞

增高：慢粒、何杰金病、癌转移、铅和铋中毒等；减低无意义。嗜酸性粒细胞

增高：

①变态反应性疾病

哮喘

荨麻诊

药物过敏 ②寄生虫病

血吸虫、丝虫、囊虫 ③皮肤病：湿诊

剥脱性皮、银屑病 ④血液病：CML、Lyphoma E白血病

⑤某些急性肿瘤：肿瘤转移或有坏死灶的恶性肿瘤

⑥某些传染病，传染病感染期，E常减低，唯有猩红热急性期E增加 ⑦其它，风湿性疾病，垂体前叶功能减退，肾上腺皮质功能减退

⑧高E综合征，少见，这组疾病包括肺浸润和E增高，过敏性肉芽肿，E心内膜炎 减低： 临床意义较小，长期应用皮质激素后

7.2．红细胞(RBC)：

7.2.1.生理性减少：见于妊娠中后期、6个月至2岁的婴儿等。

7.2.2.病理性减少：造血原料不足、造血功能障碍、红细胞破坏过多 或失血所引起的各种贫血。

7.2.3.相对性增多：主要因血浆容量减少所致，见于脱水、呕吐、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤、吸烟、高血压、肥胖等。

7.2.4.代偿性增多

主要见于缺氧、新生儿、高原环境、CO中毒、严重肺气肿、肺源性心脏病、先天性心脏病、心衰等。

7.2.5.绝对性增多

克隆性真性红细胞增多；非隆性红细胞增多，与促红细胞生成素产生过多有关，见于肾癌、肝细胞癌、雄激素分泌细胞肿瘤、肾囊肿、肾盂积水、肾移植、小脑血管瘤、子宫肌瘤。

7.3 血红蛋白(HCG)：

生理性增加：新生儿、高原居住者。

病理性增加：真性红细胞增多症、代偿性红细胞增多症（如先天性青紫性心脏病、慢性肺性疾病、脱水）。

减少：各种贫血、白血病、产后、手术后、大量失血。

7.4 红细胞比积(HCT)：

与红细胞计数、血红蛋白测定的意义类同7.5。

7.5 血小板(PLT)：

7.5.1.生理性

正常人血小板在一天内可有6%-10%变化；表现为早晨低，午后较高；春季低，冬季略高；平原较低，高原较高；静脉血比毛细血管血高10%；月经前低，后升高；妊娠中晚期升高，分娩后减低；运动后升高，休息后恢复。

7.5.2 病理性

减少：除创伤之外，血小板减少是引起出血的常见原因。常见疾病有：①、血小板生成障碍，如急性白血病、再生障碍性贫血；②、血小板破坏过多，如ITP、脾功能亢进，系统性红斑狼疮；③、血小板消耗过多，如DIC、血栓性血小板减少性紫癜。

增多（血小板大于400×109/L）：①、骨髓增生性疾病：慢性粒细胞白血病，真性红细胞增多症；②、原发性血小板增多症；③、急性大出血，急性溶血，急性化脓性感染；④、脾切除手术后。

7.6．MCV、MCH、MCHC

主要用于贫血的形态学分类，见下表

贫血的形态学分类

贫血的形态学分类

MCV（fL）

MCH（pg）

MCHC（g/L）

大红细胞性贫血

100-160

35-50

310-370

正红细胞性贫血

80-100

27-35

310-370 单纯小细胞性贫血

72-80

21-26

300-370 小细胞低色素性贫血

50-80

12-30

240-300

7.7．RDW-CV、RDW-SD：

7.7.1.用于缺铁性贫血的诊断和疗效观察，缺铁性贫血时RDW增大，经治疗后可恢复正常。

7.7.2.用于小细胞低色素性贫血的鉴别，缺铁性贫血时RDW增大，而轻型珠蛋白生成障碍性贫血时RDW正常。

7.7.3.RDW与MCV结合可将贫血分为6种。①小细胞均一性：MCV下降，RDW正常，如轻型珠蛋白生成障碍性贫血。②小细胞不均一性：MCV下降，RDW增大，如缺铁性贫血。③正常细胞均一性：MCV、RDW均正常，如某些慢性疾病。④MCV正常，RDW增大，如早期缺铁性贫血。⑤大细胞均一性：MCV增大，RDW正常，如再生障碍性贫血。⑥大细胞不均一性：MCV、RDW均增大，如巨幼细胞性贫血。

7.8．MPV、PDW、P-LCR

7.8.1.MPV 其临床意义要结合PLT的变化才二价值。①、鉴别血小板减少的原因：当骨髓造血功能损伤致血小板减少时，MPV减少；当血小板在周围血液中破坏增多时，导致血小板减少，MPV增大；血小板分布异常致血小板减少时，MPC正常。②、MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征：骨髓造血功能衰竭时，MPV与PLT同时持续下降；造血功能抑制越严重，MPV越小；当造血功能恢复时，MPV增大常先于PLT升高。③、其它：MPV增大见于骨髓纤维化、ITP、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、镰刀细胞性贫血；MPV减小见于脾亢、化疗后、AA、巨幼细胞性贫血等。

7.8.2.PDW 是反映血小板体积大小的异质性参数，增大见于急淋化疗后、巨幼细胞性贫血、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、血栓性疾病等；可用于鉴别原发性血小板增多症和反应性血小板增多症，前者PDW增加，后者PDW正常。

7.8.3.P-LCR 代表血小板计数中体积 >12fL的血小板的比值或数量，有助于识别堆集血小板、大血小板和细胞碎片，并可监测骨髓的造血功能

8.标本采集：

随机采取病人静脉血或末梢血数滴，用100g/L EDTA-K2 抗凝(20ul抗凝1ml血，相当于2mgEDTAK2/1ml血)。

9.注意事项：

9.1.血细胞计数应用EDTA-K2为抗凝剂，用量为EDTA-K2*2H2O1.5—2.0mg 可抗凝1ml血不能用肝素或枸橼酸钠等抗凝剂。

9.2.采集后在室温中贮存不应超出6h；如需制用血涂片应在2h内完成。

9.3.测定前抗凝血应充混匀，任何小凝块或血小板聚集均会影响血细胞计数。

9.4.注意病理因素对血液分析仪使用的影响，特别是各系统的报警提示。如是否有大血小板对血小板计数的影响；有无有核红细胞对白细胞计数的影响等等。

9.5.如有冷凝集现象，将血置37℃水浴箱10min后立即测试。

10.质量控制：

10.1.每日工作开始应先做上海市临床检验中心的全血质控品。

10.2.出现失控，应校正后并重做质控，直至符合质控要求。

10.3.按要求做好仪器校正和仪器对比工作。

10.4.做好质控、失控和校正登记。

11.报告复查： 对以下情况的样本进行复查(仪器及手工)

(1)白细胞不分类或者分类不完全(初检、复检)；(2)白细胞计数不出结果:——(初检、复检)；(3)单核细胞≥15%(初检)(4)淋巴细胞≥50%(初检)(5)Blast?报警信息(初检、复检),Immature Gran?(初检、复检)(6)血液科标本(初检、复检)及临床要求手工镜检标本（7）MCHC>380g/L（初检、复检）协商后设定（经临床检验科讨论后）

（8）WBC总数（WBC30×109/L）(初检)（9）PLT计数（PLT600×109/L）(初检)NRBC（有核红细胞）？与Atypical Lympho?（异淋？）,PLT Clumps