血型及交叉配血检验_血型与交叉配血实验

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红细胞血型

血型：是指各种血液成分的遗传多态性，它受独立的遗传基因所控制。由若干个相互关联的抗原抗体组成的血型体系称血型系统。

目前已发现的红细胞抗原有400余种，被归纳为27个血型系统。其中发现最早，且与人类输血关系最密切的是ABO血型系统，其次是Rh血型系统。

ABO血型系统

现知ABO遗传座位在第9号染色体长臂上，A基因的产物是N-乙酰半乳糖转移酶，它能把α-N-乙酰半乳糖分子接到一个前身物糖蛋白上，产生A抗原决定簇；B基因的产物是半乳糖转换酶，它能把α-D-半乳糖接到前身物糖蛋白上并产生B抗原决定簇；O基因不编码酶，因此是一个无效等位基因，故O型又被称为缺失型(nun type)；AB杂合子分别由A和B基因产生AB两种酶。

不同个体红细胞膜抗原经上述某种遗传基因作用，形成A、B、O、AB四种正常型别和许多亚型。它们的分型原则是：红细胞上有A抗原，血清中有抗B抗体的为A型，红细胞上有B抗原，血清中有抗A抗体的为B型；红细胞上有A和B两种抗原，血清中不含抗A和抗B的为AB型；红细胞上没有A和B抗原，血清中却有抗A和抗B抗体者为O型，H抗原存在于ABO各型红细胞上，称为H物质(基础抗原)，但以O型最多。ABO血型系统的共同特点是红细胞上含有某种抗原，血清中就不存在对应的天然抗体。反之，血清中含有某种天然抗体，红细胞上就不存在其对应抗原，此规律是Landsteiner在1900年首先发现的，故称Landsteiner定律。根据此规律用标准抗血清检测红细胞上的抗原(正定血型)，或用标准红细胞检测被检者血清中抗体(反定血型)来判断血型。

ABO血型鉴定的应用价值主要在于：

(1)在输血中寻找合适供体；

(2)在皮肤及肾移植上的供体选择；

(3)在不孕症和新生儿溶血症病因研究中的应用；

(4)ABO血型检测还可用于亲子鉴定、可疑血迹、精斑、毛发等的鉴定，以及与某些疾病相关的调查等。

另外，在ABO血型系统中尚存在一些变异型，简称之为亚型。如A型中的A2、A3、Ax、Am等；在B型中的B2、B3、Bx、Bm等。它们共同的规律是红细胞上的抗原较弱，少数个体尚存在有不规则的同种抗体。有些亚型抗原甚至弱到与抗血清的反应难以用肉眼观察的地步，必须用吸收和放散的方法证实其抗原抗体反应的存在。

了解亚型的重要性在于：

(1)易造成误定血型，可使配血不合；

(2)有额外抗体(如抗A、抗B)者常使同型间配血发生困难；

(3)误输入不相合的亚型血(抗原)，可使缺乏此抗原的受血者产生免疫性血型抗体，造成溶血的潜在威胁。Rh血型系统

Rh血型常见的抗原(又称因子)有5种(理论上推测有6种)，分别是D、C、E、c、e(d未能证实)。尚有一些变异型，如Du、Cw、En等。目前能识别的Rh系统抗原共4 3种。与ABO系统不同的是此系统很少有天然抗体，大部分抗体均由免疫刺激产生。

Rh系统中D抗原的免疫性最强，正常D阴性受血者接受一次D阳性红细胞输血后，产生抗体的机率>50％。因此，临床上往往以D抗原的存在与否定为Rh阳性或阴性。我国汉族人D阴性的比率较低，约占人群的0.2%～0.4%。因而Rh系统抗D所致的溶血反应与新生儿溶血病的比率远低于白种人，但输血和妊娠中不相合抗原所致的抗E、抗C、抗Ce、抗cE并非少见，应引起临床医生的高度重视。由免疫刺激而产生的抗体多为小分子IgG类，在盐水介质配血试验中，与相应抗原的反应仅表现为“致敏”，肉眼见不到凝集现象，必须选用木瓜酶(菠萝酶)或抗人球蛋白介质等检测手段才能发现不相合抗体。Rh血型检测在临床上的意义

1．Rh血型与输血的关系

因为正常人血中一般不存在Rh天然抗体，所以在第一次输血时，往往不会发现Rh血型的不合。Rh阴性的病人输受了Rh阳性的血液后，可产生免疫的抗Rh抗体，当病人再次输受Rh阳性的血液时，就可以出现溶血性输血反应，如果将此病人的血液再输给另外一个Rh阳性的人，由于免疫性抗体不能被中和，也可以致敏受血者的红细胞而产生溶血，在西欧各国大部分输血反应都是由抗D抗体引起。

2．与妊娠及新生儿溶血病的关系

Rh阴性的妇女如孕育Rh阳性的胎儿，胎儿的红细胞可经过有损伤的胎盘进人母体，刺激母体产生免疫性抗Rh抗体。此抗体可以通过胎盘进入胎儿血液循环，与胎儿的Rh阳性红细胞产生抗原抗体反应，破坏胎儿红细胞，甚至毒害中枢神经细胞(核黄疸)，造成新生儿溶血性贫血、流产或死产；如果孕妇需要输血，又不慎输给了Rh阳性血，也能造成严重的溶血反应。由于Rh系统存在天然抗体的机率很低，如果孕妇在受孕Rh阳性胎儿前，没有输过Rh阳性的血液，也没有注射过含有Rh抗原的血清、全血或血液制品，在第一胎时由于体内抗体效价不高，一般可以正常分娩、存活。如果孕前接受过含Rh抗原的注射或输血，第一胎就可以出现新生儿溶血病(也有少数人没有Rh抗原的接触史，而第一胎就发病)。一般胎次越多，孕妇血中的免疫性抗体效价也越高，对胎儿的损害也越严重。但是也有Rh阴性妇女，妊娠多次，没有一个胎儿出现新生儿溶血病。因此，母体在什么情况下才能产生免疫性抗体，至今还不完全明了。

3．Rh抗体可以出现在乳汁、腹水、羊水等体液中，如果羊水中抗体的滴度达到1：64时，说明胎儿有受到Rh抗体严重侵犯的危险，所以检查羊水中的Rh抗体，可以作为了解胎儿现状的一种指标。

血小板血型

血小板血型抗原有两大类：一类主要存在于血小板膜糖蛋白上的特异性抗原；另一类是与其它血细胞所共有，包括HLA I类抗原和A、B、H、Le、I及P抗原。

已报道的血小板特异性同种抗原(血小板特异性抗原)系统至少有11个。按发现的时间顺序排列如下：Duzo、PIA(ZW)、PIE、Ko(Sib)Bak(Lek)、Yuk(Perl)、Br(Hc、Zav)、PLT、Nak、GoV和Sr。其中Duzo自首次报道后未再有进一步研究。而PIE和Nak抗体的先证者已被发现分别是血小板糖蛋白(GP)Ib缺陷的巨血小板综合征患者或GPⅣ缺陷者，因此这两种抗原应列入同族抗原的范围。PLA、Ko、Bak、Yuk、Br、GoV等系统都已被证实由常染色体双等位基因以共显性模式控制。其余抗原系统也为常染色显性遗传，但是否为双等位共显性模式有待证实。

检测血小板抗原抗体反应的方法有血小板凝集试验、补体结合试验、抗人球蛋白消耗试验、免疫荧光试验等。

血小板抗体多为获得性免疫抗体、这种抗体会导致许多免疫性血小板疾病的发生，如原发性血小板减少性紫癜、新生儿血小板减少性紫癜、自身免疫性贫血伴血小板减少症综合征)、输血后紫癜、药物免疫性血小板减少性紫癜等。多次输注抗原不同血小板时所产生的抗血小板抗体，也可导致输人血反应、血小板输注无效和血小板减少症等。

输血前相容性检查

血型是一个非常庞大而又复杂的系统，加之某些疾病过程中还会出现血型暂时性变异，为了防止输入血型不合的血液，在输血前作相容性检查，常规须作交叉配血试验，即将供血者的血球和血清分别与受血者血清和血球进行交容反应，观察他们之间的相容性。交叉配血试验的目的在于： 1．发现ABO血型鉴定的错误

如将A型或A亚型献血员误定为O型，当与O型病人交叉配血时，患者血清与献血员红细胞即可出现凝集，从而避免严重的溶血性输血反应。

2．发现不规则凝集素

如含抗A 1不规则凝集素的A 2型血清，与A 1型献血员红细 胞配血时，可出现凝集，这种不规则凝集一般为冷凝素，如效价不高影响不大，但若为免疫性抗体，3 7℃条件下效价较高，就必须选用亚型相同的血液，否则可产生溶血性输血反应。3．发现其他血型抗体

如抗P1、抗H等天然抗体和抗Rh等免疫性抗体，虽然输人的血液ABO血型相同，但Rh或其他血型不同，同时能引起严重的溶血性输血反应。交叉配血的方法：

1．无输入史及异常妊娠史者，可只作盐水配血。

2．凡有输血反应史和原因不明的流产史或生育过有新生儿溶血病婴儿的妇女，皆可有免疫性抗体。应用木瓜酶、抗人球蛋白法等不完全抗体配血法。

3．病人在48小时内输入5L或更多血时，叫做大量输血，此时要多个献血员供给血液，如果献血员之间有不规则抗体或ABO系统以外的抗体，也能互相作用，引起不良输血反应，此时应作大量输血的平板配血法。

4．对多发性骨髓瘤、进行性结核病、肝病及输受过右旋糖酐的病人，避免假阳性，最好也作抗人球蛋白配血。

同型之间交叉配血不合时的处理：

1．与个别同型献血员不能配合，可另选同型献血员进行配血。

2．当病人与多个献血员配血不合时，如为盐水介质配血不合，应考虑到：

(1)ABO血型错误，须用正规方法复查血型；

(2)是否ABO亚型不合，并含有不规则凝集素，应作亚型和不规则抗体的检定；

(3)是否有非特异性凝集，如红细胞线串状形成、寒冷凝集、自身免疫性温性抗体凝集、T凝集与H凝集、类B抗原凝集等，用相应方法进行确证。如为不完全抗体配血法阳性，应考虑Rh血型不同或其他系统免疫性抗体的存在。