艾姆斯实验_艾姆斯试验

2020-02-28 其他范文 下载本文

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是艾姆斯以组氨酸缺陷型的鼠伤寒沙门菌突变株为测试指示菌所进行的致突变...后者可在缺乏组氨酸的培养基上长成菌落。此法检测的阳性结果与动物致癌性有90%相符率,其假阳性率和假阴性率均为10%左右,是检测化学物诱变作用的较好方法,可供致癌物快速初筛之用。

美国生物化学家和遗传学家。生于纽约市。...发明一种简单、有效的检测环境诱变剂的方法,即“艾姆斯试验”。

艾姆斯教授是环境化学物致突变、致癌性快速检测系统之一—艾姆斯试验(Ame”Test)的创始人。当前,环境污染与人类肿瘤的关系受到普遍重视,要确定一个化学物对人类是否有潜在致癌性,是一个重要而复杂的问题。艾姆斯试验是当前快速检测化学物致突变性、致癌性的较简便的方法之一,且已为世界上2千多个实验室所采用。我校农药毒理研究室于1977年开始移植该试验成功,并检测了一批化学农药及其他环境化学物致突变性、致癌性,获得了较满意的结果。

艾姆斯试验(Ames test)是快速地鉴别化学品、新农药和新食品添加剂的致癌性,作为致癌物质的筛选法而被广泛应用, 可以检测许多物质的致癌性。原理是用遗传学方法培植一种不能自行制造组氨酸的鼠伤寒沙门氏菌的变异体,这种菌株在无组氨酸的培养基中不能生长。如果将这种菌株与化学致癌物一起培养,则可使其dna(脱氧核糖核酸)再次突变,恢复到能制造组氨酸的原型(野生型),即在无组氨酸的培养基中也能生长。利用这一特征性变化来测试化学物质有无致突变作用,并根据生长的菌落数目还可以判定其致癌性的强弱。有些烷化剂例如氮芥、硫芥和环氧乙烷等除了能诱发各种点突变外,还能诱发一般只有辐射才能诱发的染色体畸变,所以它们也被称为拟辐射物质。

由于一切生物的遗传物质基础都是核酸尤其是DNA,所以,任何能改变核酸结构的因素都可引起核酸生物学功能的改变,例如会引起生物的“三致”(致突变,致畸变,致癌变)。同样,凡能引起核酸的其他功能改变的因素,一般也能引起突变。这是“生物化学统一性”法则的一个具体例证。具体地说,凡有致突变效应的因素,一般都有致癌、致畸效应,反之亦然;凡对原核生物有效的因素,一般对非细胞生物和真核生物也有效;凡能引起易鉴出的选择性突变的诱变因素,一般也能引起难以检出的非选择性突变;凡能引起负变的因素,一般也可引起正变;凡能引起回复突变的因素,一般也能引起正向突变;凡能诱导溶源菌裂解的因素,一般亦能引起突变;等等。这样,我们就有可能利用最简单、方便和快速的生物模型来研究最复杂、烦琐、迟缓或难以检出的有关生物学问题了。70年代中期所发明的利用微生物营养缺陷型的回变来检出化学致癌剂的艾姆斯试验(Amestest),就是巧妙地利用诱变剂作用共性原理的一个突出例子。

用艾姆斯试验测定潜在化学致癌物的基本原理是:Salmonellatyphimurium(鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸缺陷型(hisˉ)菌株在基本培养基[-]的平板上不能生长,如发生回复突变则能生长。含可疑“三致”物例如黄曲霉毒素、二甲氨基偶氮苯(奶油黄)或“反应停”的试样,加入鼠肝匀浆,保温一段时间后,吸入滤纸片中,然后将滤纸片放置于上述平板中央。经培养后,出现三种情况:如在平板上无大量菌落产生,说明试样中不含诱变剂;如在纸片周围有一抑制圈,其外才是大量菌落,说明试样中某诱变剂的浓度很高;如在纸片周围即长大量菌落,说明诱变剂的浓度合适(图8-19)。顺便要解释的是,某些物质本身并非诱变剂,可是这种“前诱变剂”往往进入动物体后经过生物化学修饰才变成诱变剂。为弥补这一缺陷,就应在测试系统中加入含有能使这类“前诱变剂”变为诱变剂的酶类(例如羟化酶等)的鼠肝提取物。艾姆斯(B.N.Ames)所创造的沙门氏菌(Salmonella)、typhimurium诱导色氨酸嗜性恢复突变而通过简单的平皿试验来获取变异原物质的方法。由于该方法可以显示许多致癌物质的变异原,所以作为致癌物质的筛选法而被广泛应用。因许多致癌物质在哺乳类动物体内受代谢活化而显示其作用,所以对药物代谢酶系统诱导处理的动物肝脏均浆9000克、10分钟离心沉淀的上澄液(S9)将加有辅酶的S9mix作为致癌物质的代谢活化系统加入于平皿中是必要的。为检取碱基代换型变异原,将TA 1535或TA100的试验菌株,与为检取移码变异原所用的TA1537、TA 1538或TA98试验菌株编组使用

Ames test是一种最常用的检测化学物质致突变性/致癌性的短期试验方法。为Ames等在20世纪60年代建立的,利用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌的回复突变特性,以检测化学物质的致突变性/致癌性;用不同株的鼠伤寒沙门氏菌可以检测碱基对置换或移码突变。在测试系统中加入微粒体酶活化系统(S9组分),以检测需经生物活化才具有致突变性的化学物质。爱姆斯试验与致癌性有较好地相关。

艾姆斯试验(Ames test)是快速地鉴别化学品、新农药和新食品添加剂的致癌性,作为致癌物质的筛选法而被广泛应用, 可以检测许多物质的致癌性。原理是用遗传学方法培植一种不能自行制造组氨酸的鼠伤寒沙门氏菌的变异体,这种菌株在无组氨酸的培养基中不能生长。如果将这种菌株与化学致癌物一起培养,则可使其dna(脱氧核糖核酸)再次突变,恢复到能制造组氨酸的原型(野生型),即在无组氨酸的培养基中也能生长。利用这一特征性变化来测试化学物质有无致突变作用,并根据生长的菌落数目还可以判定其致癌性的强弱。艾姆斯试验

拼音:aimusishiyan

英文名称:Ames test

说明:是较受重视的快速初筛化学致癌物的试验方法。生物遗传突变被视为癌形成的关键。因此,要利用化学物质对某些微生物的致突变来测定其致癌活性。它的原理是:用遗传学方法培植一种不能自行制造组氨酸的鼠伤寒沙门氏菌的变异体,这种菌株在无组氨酸的培养基中不能生长。如果将这种菌株与化学致癌物一起培养,则可使其DNA(脱氧核糖核酸)再次突变,恢复到能制造组氨酸的原型(野生型),即在无组氨酸的培养基中也能生长。利用这一特征性变化来测试化学物质有无致突变作用,并根据生长的菌落数目还可以判定其致癌性的强弱。

Ames试验(Ames test)

一种简便快捷的检测化合物致突变性(致癌性)的初筛方法。Ames试验原理

用遗传学方法培植一种不能自行制造组氨酸的鼠伤寒沙门氏菌的变异体,这种菌株在无组氨酸的培养基中不能生长。如果将这种菌株与化学致癌物一起培养,则可使其DNA(脱氧核糖核酸)再次突变,恢复到能制造组氨酸的原型(野生型),即在无组氨酸的培养基中也能生长。利用这一特征性变化来测试化学物质有无致突变作用,也即致癌性,并根据生长的菌落数目还可以判定其致癌性的强弱。Ames试验的产生与发展

20世纪40年代后期, Auerbach和Robson曾指出“化学物质可能是很强的诱变剂”,引起了人们普遍的关注.这些关注导致了20世纪60、70年代与环境监测有关机构的成立以及一系列检测环境致突变物、致癌物方法的建立。

致突变物、致癌物通常采用Ames于1966年建立并不断改进、完善的沙门氏菌/微粒体回复试验,即借助化学物质的致突变作用(损伤遗传物质DNA的能力)鉴定化学致癌物和致突变物.致突变物能使测试菌株回复突变成野生型的能力大大提高,明显高于阴性对照,并伴有剂量-效应关系由于该法实验周期短、简便,是目前世界上各个实验室普遍采用的检测环境来源的大量潜在致癌物的通用初筛方法之一。

自Ames测试建立以来,不断有学者对其进行了各方面的改进, Ames测试的准确性、有效性也得以不断提高,并日益被广泛采用.但至今该测试仍只是一个有效但不完美的检测致突变物的方法,该测试在试验设计、试验过程及试验结果判定上都存在一定疑问和不确定性因素.例如估计一个微生物群体的自发突变率和诱发突变率在遗传理论上和试验技术上都是一个涉及多方面因素的复杂性难题;诱发突变率的估计涉及到对两个正态分布的混合分布的估计,它需要大量的样本,但Ames测试中样本数(测定回复突变的培养皿数)均较小,无法用条件矩估计等方法测定混合分布的参数[5];DNA发生突变的随机性和诱发因素的相关性更是遗传机理上尚未阐明的难题;另外用Ames测试检测中药制剂的微生物致突变作用是否适当,更是目前迫待解决的问题。

艾姆斯(B.N.Ames)所创造的沙门氏菌(Salmonella)、typhimurium诱导色氨酸嗜性恢复突变而通过简单的平皿试验来获取变异原物质的方法。由于该方法可以显示许多致癌物质的变异原,所以作为致癌物质的筛选法而被广泛应用。因许多致癌物质在哺乳类动物体内受代谢活化而显示其作用,所以对药物代谢酶系统诱导处理的动物肝脏均浆9000克、10分钟离心沉淀的上澄液(S9)将加有辅酶的S9mix作为致癌物质的代谢活化系统加入于平皿中是必要的。为检取碱基代换型变异原,将TA 1535或TA100的试验菌株,与为检取移码变异原所用的TA1537、TA 1538或TA98试验菌株编组使用。

艾姆斯试验是较受重视的快速初筛化学致癌物的试验方法。艾姆斯试验是快速地鉴别化学品、新农药和新食品添加剂的致癌性,作为致癌物质的筛选法而被广泛应用,可以检测许多物质的致癌性。

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