《免疫学技术与方法原理》教学大纲._免疫学课程教学大纲

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《免疫学技术与方法原理》教学大纲

主讲教师 张双民 齐浩

一、本课程目的和要求

《免疫学技术与方法原理》是为我院所有专业学生开设的选修课.免疫学技术是当今生命科学实验研究和临床及预防医学领域的重要手段,尤其在医学基础研究和临床医学实践中应用极为广泛。通过对该课程的学习,目的是使学生了解和掌握主要免疫学技术的方法和原理,扩大学生知识面,开阔他们的视野。

本课程应安排在应是在细胞生物学、微生物学、生物化学、免疫学等课程之后,适于对大四开设。本课程总学时为36学时。

二、本课程的主要教学内容

绪 论(2学时)

一、免疫学与免疫学技术的发展史

二、免疫学技术的广泛应用

三、免疫学技术的发展现状

四、免疫学技术的发展趋势

第一章 抗原抗体反应基本原理(2学时)

第一节 抗原抗体结合的一般原则

1.抗原 2.抗体 3.抗原抗体结合的一般原则 4.参与反应的抗原抗体比例

第二节 抗原抗体结合反应的机理 第三节 影响抗原抗体结合反应的因素

1.电解质 2.温度 3.pH 第四节 抗原抗体结合反应主要应用

1.补体检测 2.免疫球蛋白检测 3.免疫复合物检测

4.细胞因子检测

第二章 抗体的制备与分离纯化技术(4学时)第一节 抗体的制备技术

1.原理 2.动物的选择 3.抗原的处理 4.动物的免疫

第二节 多克隆抗体的制备 1.颗粒抗原 2.可溶性抗原 3.半抗原 第三节 抗体的分离纯化技术

一、原则

二、方法: 1.盐析法 2.凝胶柱层析 3.离子交换层析 4.免疫吸附亲和层析

第三章 抗原的制备与分离纯化技术(2学时)

第一节 抗原的概念和结构: 1.抗原与抗原决定簇(表位)2.抗原-抗体结合的结构基础 第二节 抗原类型及抗原性

1.就其化学本质而言 2.就其反应性而言

第三节 抗原分离纯化技术

第四章 免疫标记技术(7学时)

第一节 放射免疫技术: 1.原理 2.基本试剂和技术方法 3.技术进展

第二节 酶免疫技术: 1.原理 2.酶标抗体的制备 3.酶免疫技分析中的放大作用

4.酶免疫技分析的应用及发展趋势

第三节 免疫荧光技术: 1原理 2.标记方法 3.应用

第四节 化学发光免疫分析:1.原理 2.方法类型 3.应用及展望

第五章 时间分辨免疫荧光分析(3学时)

第一节 时间分辨免疫荧光分析: 1.原理 2.类型

第二节 双标记时间分辨免疫荧光分析: 1.原理 2.应用 第三节 酶放大时间分辨免疫荧光分析: 1.原理 2.应用

第六章 分子免疫及免疫遗传学的技术与方法(8学时)

第一节 DNA的分离与纯化 1.注意事项 2.几种常用方法

第二节 核酸分子探针标记技术: 1.切口平移法 2.随机引物法 3.DNA末端标记法 第三节 核酸分子杂交技术: 1.原理和类型 2.操作步骤 3.注意事项 第四节 cDNA文库的构建及抗体筛选法: 1.cDNA文库及其构建

2.cDNA表达文库的抗体筛选法

第五节 HLA基因配型分型技术

一、HLA基因及其配型分

二、HLA-II类基因配型方法: 1.PCR-SSCP法 2.PCR-DCP法 3.PCR-F法

三、HLA-II类基因分型方法: 1.PCR-SSO法 2.PCR-RFLP法 3.PCR-SSP法

第七章 免疫印迹技术(4学时)第一节 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第二节 转移电泳 第三节 免疫学检测

第八章 免疫电镜技术(4学时)

第一节 基本原理和方法: 1.原理 2.免疫标记方法 3.标本处理 第二节 透射免疫电镜技术: 1.抗体不同标记方法 2.注意事项

第三节 扫描及冷冻蚀刻免疫电镜技术: 1.标记物2.标记方法3.标本处理

第四节 电镜水平原位杂交: 1.原位杂交主要原则 2.杂交结果显示 3.标本处理