手足口病病例病原学检测结果分析_手足口病病例分析

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手足口病病例病原学检测结果分析

了解2010年广州地区手足口病病例标本中CoxA16和EV71的感染情况。方法 采集临床诊断为手足口病患者的粪便，用Real-time PCR同时检测总肠道病毒、CoxA16和EV71。结果 共检测手足口病病例标本1271例，总肠道病毒阳性率为61.32%；其中，CoxA16阳性率占29.82%，EV71阳性率占70.18%。阳性标本主要分布于0~4岁患者阶段，总肠道病毒、CoxA16和EV71阳性数分别为694、209和485。结论CoxA16和EV71为广州地区2010年手足口病的主要病原，EV71占多数，0~4岁儿童是感染的主要人群。

手足口病(hand foot and mouth disease, HFMD)由肠道病毒感染引起,主要表现为口腔黏膜溃疡性疱疹及四肢末端水疱样皮疹,主要病原体为肠道病毒71型(human enterovirus 71，EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxackievirus A16，CA16)。2010年度，广州市疾病预防控制中心检测手足口病病例粪便标本1271份，现将检测结果报告如下。

1．材料与方法

1.1 标本来源 标本为医院诊断为手足口病患者的粪便，共计1271份。标本均由医院或者各级疾病预防控制中心送检。

1.2 方法

1.2.1 样品前处理 粪便用生理盐水混悬、浸泡，2000r/min离心10min，取上清液。

1.2.2RNA的提取经前处理的样本，使用QIAGEN® Viral RNA试剂盒提取RNA。

1.2.3荧光定量PCR反应首先使用广州华银医药科技有限公司生产的总肠道病毒（pan EV）荧光PCR检测试剂盒检测。将总肠道病毒荧光定量PCR检测阳性的标本，使用硕士生物科技有限公司生产的手足口EV71型/CoxA16型病毒RNA双重荧光PCR检测试剂盒，分型检测。

2.结果

2.1荧光定量PCR结果在检测的共1271份标本中，有778份标本肠道病毒阳性，总阳性率61.32%。

2.2 病原体分类在778份总肠道病毒阳性的标本中，CoxA16阳性232份，阳性率29.82%；EV71阳性546份，阳性率70.18%。

2.3 病例时间分布 2010年广州地区，病例标本送样集中于4～7月和10月，总肠道病毒、CoxA16和EV71检出的阳性数在4～7月为高峰期。

请将表横竖栏对调。

表1广州市2010年手足口病例数各自然月分布

1月 2月 3月 4月 5月 6月 7月 8月 9月 10月 11月 12月

样品总数 41 1 43 229 261 305 143 31 80 603 45 37

总肠道病毒阳性数 13 0 23 176 152 188 114 13 41 28 17 13

CoxA16阳性数 4 0 7 69 36 31 37 1 16 18 8 5

EV71阳性数 9 0 16 107 116 157 77 12 25 10 9 8

2.4 患者年龄分布在送检标本的患者中，最小年龄为3个月，最大为58岁，患者年龄主要集中在1～4岁，标本数为1099份，占标本总数的86.47%。总肠道病毒、CoxA16和EV71阳性数均以1～4岁最多，其他年龄阶段较少，见表2。

将表2横竖栏对调

表2阳性标本在各年龄阶段的分布

年龄/岁 0～4 5～14 >14

总肠道病毒阳性数 694 51 6

CoxA16阳性数 209 20 2

EV71阳性数 485 30

43.讨论

手足口病是一种常见的较温和的出疹性疾病,主要感染0～3 岁的儿童。引起该病散发及暴发或流行的2大主要病原是EV71和CA16。我国自1980 年开始有HFMD 的报道。1985年以前，CA16是该病的唯一病原,但最近的研究结果显示，EV71 在HFMD的病原学中占有越来越重要的地位⑴。根据广州市疾病预防控制中心统计，2010年度，广州地区共报告手足口病临床及实验室诊断病例35339例，居丙类传染病发病数第1位；其中报告53例重症病例和3例死亡病例；2010年报告病例数较2009年同期的14066例上升151.24%。手足口病已经成为广州地区危害儿童身体健康的重要疾病。

手足口病的传染源是患者和健康带病毒者,患者在出现症状前数天其血液、鼻咽分泌物和粪便中均存在病毒,因而在潜伏期就具有很强的传染性⑵。对2010年广州地区手足口病例的送检标本进行分析，总肠道病毒阳性率为61.32%，较广州市疾病预防控制中心在2008年检出的总肠道病毒9.63%的阳性率⑶大大增高，可能与2008年期间，安徽阜阳发生HFMD后,特别是5月2日卫生部将HFMD纳入丙类法定传染病报告管理后,家长的就诊意识和医务人员的诊断意识提高,使得HFMD的病例数和标本数骤增，大部分病例虽然具有部分HFMD的临床特征,却并非由肠道病毒引起⑷，造成了2008年阳性率偏低有关。

根据2010年检测结果显示，引起广州地区手足口病散发及暴发或流行的2大主要病原仍是EV71和CA16。EV71的阳性数高于CoxA16的阳性数，是流行的主要病原体，也与广州周边地区的发病相类似⑸。

从发病时间来看，手足口病样品检测的高峰都处于4~7月间，另外，在10月左右会有一个小高峰。这与手足口病发病的季节性为夏秋2季相吻合，检测送样的高峰与发病的高峰吻合。在中国其他地区也有类似的流行高峰⑹⑺。

从患者年龄来看，阳性标本主要集中在0~4岁的患者中，这与以往研究结果相似⑻.在针对法兰克福大学医院696例非手足口病患者的CoxA16和EV71血清抗体的流行病学研究中发现，1~4岁阶段，CoxA16和EV71血清抗体阳性率分别为27.0%和12.0%，到5岁后阳性率分别迅速增高到52.0%和49.0%⑼。这说明，由于在1~4岁阶段的幼儿缺乏相应抗体，使得他们对CoxA16和EV71普遍易感。因此，0~4岁儿童成为手足口病防控的重点人群。