亚致死效应测定方法[推荐]_亚硝酸盐测定方法

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亚致死效应

1、知识背景：

亚致死效应相对于直接致死作用而言，指施药一段时间后，杀虫剂对存活个体的作用（Desneux et al．，2007）。亚致死效应表现在害虫（螨）生长发育及生殖的改变、生态行为的变化和抗药性的发展等（Stark and Banks，2003）。田间喷洒杀虫（螨）剂，除可以杀死大部分害虫（螨）外，对存活个体（即抗性个体）存在亚致死胁迫效应；另外，随着时间的推移，药效的部分丧失，一些非抗性个体也将处于药剂胁迫下，亚致死胁迫问题更加凸显。亚致死剂量的杀虫剂可影响昆虫（螨）的生物学特性，甚至诱导抗药性产生，特别是繁殖速率快、发生世代多的害虫（螨），其抗药性发展尤为迅速。

2、某杀虫（螨）剂（指单剂）对害虫（螨）F0代雌成螨的亚致死效应

准备工作：已经知道某杀虫（螨）剂单剂对该害虫（螨）的毒力回归方程式（或称毒力回归曲线），根据该方程式，计算出某亚致死浓度，哪些是亚致死浓度呢，不同人有不同看法，归结到一点，亚致死浓度是个范围问题，我们就取LC15和LC30。

正式操作步骤：

（1）收集孵化24 h内的雌成螨：可以从一匹卵开始培养，方法如下：

a、事先准备一些培养皿，里面垫上一块和培养皿大小配套的海绵，加水，使海绵吸饱水分，再在海绵上放上若干篇酢浆草离体叶片（该叶片应该事先在解剖镜下检查有无可见生物，并除去，还应用清水清洗）；

b、挑雌成螨（年龄不限）若干头，让其产卵1-2天，收集足够多的卵，大约300粒以上；

c、继续培养收集的卵，直至其发育到雌成螨（24 h以内），用于以下实验（2）。

（2）用药膜法（浓度为LC15）处理雌成螨（24h以内）（应该注意提前制作药膜，一旦雌成螨孵化就要处理）24小时。（建议至少做5管）

（3）将存活的雌成螨螨单头放置于离体的叶蝶上（见上述（1）a的制作方法），并有1头雄成螨与之配对（来源不限，可以是离体叶片上培养的，也可以是花盆植株上的）。逐日观察记录雌成螨寿命及产卵数，若雄螨死亡应及时补充。直到雌成螨死亡。——记录表格参考表1。

3、某杀虫（螨）剂（指单剂）处理F0代雌成螨后，对F1代的亚致死效应

主要观察F1以下数据：卵的孵化率、发育历期、成螨性比。方法如下：

单头饲养法（记录表格可参考表2）：

A、在上述2（3）实验观察中，收集卵（不必要是同一天的），至少120粒，单头饲养，记录每粒卵的起始日期。

B、逐日记录F1代发育情况，以便统计发育历期；

C、发育到成螨时，统计性比。

注意：

1、以上实验过程中，一定要及时更换叶片！

2、