柑橘果实的糖、酸、维生素c测定法_维生素c测定荧光法

柑橘果实的糖、酸、维生素c测定法由刀豆文库小编整理，希望给你工作、学习、生活带来方便，猜你可能喜欢“维生素c测定荧光法”。

柑橘果实的糖、酸、维生素C测定法

中国农业科学院柑桔研究所实验室

柑桔果实的糖、酸、维生素丙的定量测定，对柑桔品种比较鉴定，柑桔施肥、贮运等研

究有重要的意义。为适应当前科学试验需要，兹介绍这些化学成分的简易而迅速的测定方法，供有关方面参考。

一、糖的测定

测定的方法是以还原糖在碱性溶液中能将硫酸铜还原为氧化亚铜的特性为基础，用待测

液直接滴定一定体积、已知浓度的铜碱性溶液，以次甲基兰为指示剂，由于次甲基兰能被碱性溶液中的糖还原为无机化合物，故终点明显。反应方程如下：

OCHCOONaHO—CH--COONa

RC+2Cu+2H2O= RCOOH + 2+Cu2O

H OCHCOOKHO—CH – COOK

此法只能测定具有自由的醛基或铜基的还原糖。双糖则用无机酸水解成单糖后，在用此

法测定。

试剂：

1.斐林试剂A：分析纯硫酸铜（CuSO4·5H2O）34.69g溶于水中，定溶至500mL，过滤备

用。

2.斐林试剂B：50g分析纯氢氧化钠溶于水中，加入分析纯酒石酸钾钠173g，定溶至500 mL。

3.次甲基兰指示剂：1克次甲基兰溶于100毫升水中。

4.葡萄糖标准液：纯无水葡萄糖溶于105℃烘干至恒重，准确称取0.5克左右，用水溶解

并定溶至100 mL。

测定步骤：

1.斐林试剂混合液的标定

吸取斐林试剂A和B各5毫升混合于250毫升三角瓶中，再加入50毫升水。将葡萄糖标准液注入滴定管中，然后预先滴加一定 体积于A、B混合液里，加热至沸腾。沸腾一分半钟后，加入两滴次甲基兰指示剂，又隔半分钟，继续滴加葡萄糖标准液，直至混合液的蓝色完全消失呈现砖红色，即为终点。

滴定应迅速，从煮沸到滴定终了总共不超过三分钟。在加热前向混合液中预加的葡萄糖标准

液量应近似滴定值，使沸腾后滴加葡萄糖标准液的量在1.5—1.0毫升范围内，若超过或不足，则应将加热前预加的量增减，至适合为止。重复滴定二次，滴定值相差不超过0.2毫升。

计标：

每毫升斐林液相当于葡萄糖克数K=GⅹT Wⅹ10

G：葡萄糖称量（即0.5克左右）

W：葡萄糖定容量（100毫升）

T：葡萄糖标准液滴定时所耗的量（毫升）

2.试剂的制备和测定

还原糖：吸取经过滤的果实原汁25毫升，用蒸馏水稀释至250毫升，将此稀释液注入

滴定管中，按斐林液标定法进行滴定。

转化糖：吸取经过滤的果实原汁10毫升于100毫升容量瓶中，并加入蒸馏水40毫升，浓盐酸（化学纯）5毫升，然后将此容量瓶放入水浴锅中，使瓶中溶液温度保持在60—80℃，半小时后取出，用40%氢氧化钠和10%氢氧化钠中和，冷却定容。再以测定还原糖的方法进行。计算：

KⅹMⅹC还原糖% = ⅹ100D

（或转化糖%）

蔗糖% =（转化糖%—还原糖%）ⅹ0.95

K：每毫升斐林液相当于葡萄糖克数

M：斐林液量（即5+5=10毫升）

C：果汁稀释倍数

D：试剂滴定时所耗毫升数

一、酸度的测定

本测定是用中和法酚酞做指示剂，以滴定所消耗碱的毫升数计算酸度。因柑桔类果实中所含的酸以柠檬酸为主，故在酸度计算时，通常用柠檬酸表示。

反应方程式如下：

2COOH2COONa

HO—+ 3NaOH = HO —+ 3H2O

2COOH试剂：

1.1%酚酞指示剂。

2.氢氧化钠溶液：化学 纯氢氧化钠4克，溶于1000毫升新煮沸并冷却的蒸馏水中。

标定：精确称取苯二甲酸氢钾20.422克左右，用蒸馏水溶解并定容于1000毫升容量瓶中，吸取10毫升，加一滴酚酞指示剂，用上述配置的氢氧化钠滴定至桃红色不退色为终点。

计算： N = M0.20422ⅹV1

20.422 ⅹ10克)1000N：氢氧化钠溶液的当量浓度 M：用于滴定的苯二甲酸氢钾克数(本例M =

0.20422：苯二甲酸氢钾的克当量数

V1：标定时耗去的氢氧化钠溶液毫升数

测定步骤：

用移液管吸取10毫升测定还原糖所剩的果汁稀释液，注入100毫升三角瓶中，加一滴酚酞指示剂，用已标定的氢氧化钠溶液滴至微红色为终点。

计算：酸度% = NⅹV2ⅹ0.064 ⅹ100 G

N：氢氧化钠溶液的当量浓度

V2：滴定所耗氢氧化钠毫升数

G：用于滴定的果汁量（即25ⅹ10毫升）250

0.064：每毫升0.1N氢氧化钠相当于柠檬酸克数

三、维生素丙（Vc）的测定

利用Vc还原性与2，6-二氯苯酚吲哚酚钠所起橙色反应而决定其滴定终点，以2，6-二氯苯酚吲哚酚钠的用量计算出样品中Vc的含量。

试剂：

1.1%草酸溶液：称取化学纯草酸10克用蒸馏水溶解，并定容至1000毫升。

2.标准Vc液：准确称取纯抗坏血酸20毫克左右，用1%草酸溶液溶解并定容至100

毫升。

3.2，6-二氯苯酚吲哚酚钠溶液：称取62.5毫克2，6-二氯苯酚吲哚酚钠溶于150毫升

经煮沸的热蒸馏水中，加小苏打（NaHCO3）52.5毫克，摇匀后冷却定容为250毫升，装入棕色试剂瓶中，放入冰箱中保存，每星期应重新配制一次，以保证测定的准确。

2，6-二氯苯酚吲哚酚钠溶液的标定：吸取5毫升标准Vc溶液于三角瓶中，用2，6-二氯苯酚吲哚酚钠滴定到微红色为终点。计算如下：

PMⅹQH =W

H：2，6-二氯苯酚吲哚酚钠滴定度

M：Vc的称量（即20毫克左右）

P：用来滴定的Vc毫升数

Q：Vc定容毫升数

W：滴定所耗2，6-二氯苯酚吲哚酚钠毫升数

测定步骤：

吸取经过滤的果实原汁5毫升于100毫升容量瓶中，立即用1%草酸定容到刻度。吸取此稀释液10毫升已标定的2，6-二氯苯酚吲哚酚钠溶液滴定至微红色为终点。计算：

Vc毫克/每100毫升果汁= HⅹV ⅹ100 G

H：2，6-二氯苯酚吲哚酚钠滴定度

V：滴定所耗2，6-二氯苯酚吲哚酚钠毫升数

G：用于滴定的果汁量（即

5ⅹ10毫升）100