制药工程专业英语_专业英语制药工程

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民族药物学杂志93(2004)409–415

来自桔梗grandiflorum A.De Candolle根的有机提取物的抗氧化和抗癌活动

生物技术研究所、韩国大学，亚南东，Sungbuk东京都，首尔136-701，大韩民国二系生物化学、医学大学、高丽大学，亚南东，Sungbuk东京都，首尔136-701，大韩民国

2003年5月21日收到初稿；收到修订稿日期是2004年3月20日且与2004年4月26日接受 摘要

这是作为草药和食品在亚洲使用的植物。桔梗grandiflorum石油醚提取物硅胶柱色谱梯度溶剂(石油醚：乙醚，9:1–5:5，v/v)(分数I–V)。的 不论在抑制脂质过氧化和自由基的清除抗氧化活性组分进行了评价活动。第二部分，在8:2的混合石油醚和乙醚提取的，表现出伟大的抗氧化活性在分数中。另一方面，每个部位的细胞毒性，这是由MTT使用计算人类癌症细胞线(HT-

29、HRT-18和HepG2)，最大分数第三，这是一个7:3石油醚提取和乙基醚混合物。两种 分数、第二和第三，是子分割的薄层色谱，分分数的每个被屏蔽的抗氧化及抗癌活动。此外，抗氧化活性与酚类化合物的内容密切相关，与抗癌活性 聚乙炔的分数表现出了典型的紫外光吸收谱。©2004全文电子刊爱尔兰有限公司 版权所有。

关键字：抗氧化活性；细胞毒性；桔梗grandiflorum；清除；美腾

引文：

添加抗氧化剂对各种食物，防止或 阻止自由基诱导的脂质氧化，负责flavors和不良的发展食品中的化学化合物(Angelo，1996)。在表单中的生物系统还可以生成自由基活性氧(氧)，如超氧阴离子 自由基(O2•−)，过氧化氢(H2 O2)，羟基自由基(OH•)，单线态氧(1 O2)(哈利韦尔等。, 1995)。这些反应活性氧导致不可逆转的破坏 组件损坏的细胞，如脂类、蛋白质与DNA(Lopaczyski和Zeisel，2001)。虽然正常 细胞拥有对活性氧的抗氧化防御系统，细胞损伤的不断积累导致疾病，如癌症和老化(Matés和Sánchez Jiménez，2000)。通过消除活性氧在连续的抗氧化剂量也有预防这些疾病的作用生物系统(斯甘巴托等。，2001)。抗肿瘤药物，另一方面，主要是相关的 损坏的系统的治疗作用。正常情况下，DNA或其他组件的单元格 由各种原因不可逆转的损坏进行凋亡细胞死亡，这是一个自我毁灭的代谢根据基因编码细胞死亡信号(Korsmeyer，1995；胡珀等。，1999)。不过，癌细胞 已经不可逆转地开发，获取能力，以逃避通过多种方式的凋亡。抗肿瘤药物的目的 触发器在这些癌细胞凋亡信号系统虽然扰乱它们的扩散(加粗等。，1997)。有很多开发与各种生物活性的植物，包括抗氧化剂，anti-inflammatory和抗癌活动。例如，一些研究报告，天然产物提取物，如水果、蔬菜和中药，对癌症产生积极影响，而化疗或最近荷尔蒙治疗(Pezzuto，1997；吴等。，2002)。因此，许多植物 已检查以确定新的和有效的抗氧化和抗癌化合物，以及澄清吗 预防癌症和凋亡的机制(Pietta等。, 1998；金等。1998；Swamy和Tan，2000)在particu，东方药用植物被认为是其中之一 由于他们的各种物种的最有希望的来源应用程序。此外，其疗效已 亚洲许多几十年的临床使用证明。桔梗根grandiflorum。Candolle(韩国名，Doraji，日本名字，桔梗，和中文名字，'Jiegeng')，属于桔梗科家人曾作为食品原料或东方传统医学。桔梗提取物grandiflorum已报告有广泛的健康benefits。特别是，在韩国，4年的根 一直被用来治疗支气管炎、哮喘、肺结核、糖尿病和inflammatory疾病(青木和吗李1972；李，1973)。最近，其immunopharmacological的影响研究(Nagao等。1986)，和一

∗对应 作者。电话。：+86 822点3290 3435；传真：+86 822点927 5201。电子邮件地址：limst@korea。交流。氪(S。-t。林)杰。-你们。李等。民族药物学93/日志(2004)409–415

些 活性化合物，如三萜(Nikaido等。，1999)和皂甙(石井等。1984)已identified。一些 研究甚至延长桔梗的培育期 22年的grandiflorum使用获得专利的方法(李，1991)，报告说，其水提取物是有效防止胆固醇、血脂异常，CCl4诱导肝毒性(Leeand Jeong, 2002）

先前的研究中，据报道，原油 桔梗grandiflorum石油醚提取物对人肿瘤细胞表现出强烈的抑制活性增长，有机提取物是更大的活动 比水提取物(李等。，1998)。在这 研究中，桔梗grandiflorumroot石油醚提取物是分次使用渐变溶剂、和与商业的抗氧化活性的比较 抗氧化剂。此外，抗癌活性 分数也检查。

2。材料与方法 2.1。物质 切碎和干桔梗根grandiflorumA。直流(桔梗科家族)Youngju栽培，韩国是从东方草药市场购买，和韩国分子医学和营养研究所confirmed身份。人体直肠(HRT-18)，肝癌(HepG2)和冒号(HT-29)癌细胞株是从美国购买类型文化集合(马里兰州、美国)。Dulbecos Modified鹰介质(DMEM)，胎牛血清及trypsin–EDTA获得了从Gibco肝(大 岛，纽约，美国)，以及文化用品等48-嗯板是向Nunclon品牌产品。3-(45-Dimethylthiazol

2)-25-diphenyltetrazolium溴(美腾)、11-二苯-2-picrylhydrazyl(清除)是从西格玛-阿德采购公司(st。路易斯、钼、美国)。硅酸(生物南港100–200网)是从生物实验室的产品。(Richmond CA，美国)，薄层色谱分析和制备(薄)是使用硅胶60 F254(默克，达姆施塔特、德国).2.2。提取和分离 桔梗grandiflorum的干燥根(600克)磨成粉，和石油醚提取(4)在室温72℃的振动。在粉之后 粒子已经确定，清除黄色的上清液 filtered 0.22␮m孔尺寸聚四氟乙烯filter(Milipore公司, 比尔里卡，美国)，集中(10.3克，干重)真空蒸发。集中被分割(分数I–V)与溶剂的使用硅胶柱 渐变石油醚和乙醚(9:1–5:5)，和分数集中在减少压力之下.2.3。抗氧化活性的测定

2.3.1。硫氰酸铁测试(FTC)使用硫氰酸铁的抗氧化活性分析根据报告的大泽的方法是执行吗 和Namiki(1981)。干六百微克从每个分数的固体溶于0.12毫升98 乙醇和2.51的亚油酸溶液2.88毫升EtOH和9毫升40毫米的磷酸盐缓冲(7.0)已添加。在40◦C在黑暗的混合物螺旋盖瓶。在孵化期间，0.1毫升的部分是 从混合，稀释75的9.7毫升乙醇，其次是增加0.1毫升30硫氰酸铵。3分钟后添加0.1毫升20毫米3.5盐酸中氯化亚铁，在500纳米的红色吸收测量。的 抑制脂质过氧化水平的每个分数 吸光度比值计算，没有任何样品的空白。

2.3.2。硫代巴比妥酸测试(总胆汁酸)这是根据Kikuzaki和Nakatani报告的方法执行(1993)。两毫升 20三氯醋酸酸和硫代巴比妥酸溶液添加2毫升到1毫升含亚油酸的混合解决方案，根据FTC的准备过程。混合物放在沸腾的水 浴10分钟。在冷却之后，混合料离心机在20分钟的转速可达3000，和上清液吸收测量在532纳米.2.3.3。DPPH自由基清除测试布洛伊斯所描述的这个测试来衡量(1958)。其中一个 毫升的部分解决方案(50、100和200␮g/毫升乙醇)添加到清除解决方案的1毫升(0.2毫米 乙醇)。在30分钟以后，室温反应，吸收的解决方案是为517纳米。每个分数的清除自由基的活性通过比较其吸光度与空白的决定解决方案(示例)。

2.4。对肿瘤细胞的细胞毒性(美腾测试)从原油馏分I–V分居使用硅胶柱和梯度溶剂醚提取物(9:1–5:5)，产生0.02–0.33 g/g，基于初始重量粗提取物(表1)。总酚含量 在分数介乎

1.66至4.80毫克/克，与分数第二，后者是eluted，8:2的混合石油醚 和乙醚，包含酚的最高水平化合物。这是根据执行过程的轻微modification Mosmann报告(1983)。在 48-嗯板，人类癌症细胞悬液(3×104 细胞/好)是在37◦C为24。单元格 然后漂洗和种植在新DMEM包含每个分数(␮g/300毫升)。在24或48的孵化之后，在37◦C，DMEM被删除，而细胞再次创业 再次与DMEM的0.25毫升和0.05毫升的美腾解决方案(␮g/0.5毫升)为4小时。0.7毫升株缓

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冲区(20 50烷基硫酸钠N，n-甲酰胺、pH值 4.6)被添加到每个解散美腾产生的紫甲腊，这些细胞被孵化 在未来2小时。板读取使用分光光度计(型号DU-64)at2

2.6。薄层色谱(薄)硅胶柱的分数分析与石油的流动相薄层ether:chloroform:methanol(15:7:3伏/视频/视频)(A)或石油 醚：乙醚：醋酸(80:20:1 v/视频/视频)(B)根据报告的过程稍微modificationAmarowicz等。(2000)。薄层上的分隔点 identified板在紫外灯短(254纳米)和长(365纳米)波长，并喷洒 H2 SO4。酚类化合物可以可视化的喷涂板1 FeCl3解决方案中的盐酸1美元(Reio，1958)。快速检测抗氧化景点的活动，车牌是沾了清除 解决方案(搁楼里瓦斯等。，2000)。在识别之后，多数 板上的活动现场，使用一个薄层板的制备 刮和收集大量的定量清除抗氧化活性的检测。

3。结果和讨论

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