乙肝病毒中HbsAg的检测_乙肝病毒检测对照表
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金标法与ELISA法检测乙肝病毒中HbsAg的方法比较
【摘要】 目的 用酶联免疫吸附法(ELISA)评价胶体金测试卡检测乙肝两对半的性能。方法 选用ELISA检测乙肝表面抗原(HbsAg)阴性100例,阳性者100例,用胶体金测试卡和ELISA分别检测乙肝两对半对比结果和检测用时。结果 胶体金测试卡单个标本的检测时间为25min,而ELISA的为1h。100例HbsAg阴性标本除2例HbcAb ELISA检测阳性而胶体金测试卡检测阴性外,其他结果均相同。200例HbsAg阳性标本中,胶体金测试卡法检测6例HbsAg阴性,符合率97.0%;9例HBeAb检测阴性,符合率92.9%;7例HbcAb检测阴性,符合率96.5%。结论 胶体金测试卡与ELISA相比,不需要特殊设备,易于观察结果,快速检测单个标本,操作简便,特异性较高,能满足急诊的需要。【关键词】 乙肝两对半;胶体金测试卡;ELISA 乙型肝炎病毒（HBV）感染仍是威胁着人民健康的全球性问题。目前，全世界受HBV感染者接近20亿人［1］。在我国人群中,乙型肝炎病毒(HBV)感染率一直较高,尤其是20世纪80年代中期以前出生的人,HBV感染率超过10%［2］。随着人们健康意识的增强,乙型肝炎病毒血清标志物两对半(以下简称两对半)检测已成为人们的日常体检、门诊和手术 前必须做 的常规检查项目,做到对乙肝早诊断、早预防、早治疗,降低医院内交叉感染。目前实验室普遍采用的ELISA检测, 此法灵敏度可达ng/ml水平［3］ ,但需要相应设备,检测时间长,操作较繁琐,不便单样本快速检测。胶体金测试卡不需要相应设备,操作简便耗时短，但其性能指标任然需要更多的检测。因此,我们现将ELISA检测HbsAg阴性100例,阳性者100例,用胶体金测试卡和ELISA分别检测乙肝两对半对比报告如 下： 1 材料与方法 1.1
材料标本来自：红会医院2011年4月一2011年11月的病人，共计202人，年龄20-65岁，其中男107人，女95人。用一次性无菌注射器静脉采血，置室温在30分钟一1小时后离心析出血清。
1.2 试剂和仪器：金标法检测试剂板由艾康生物技术有限公司(杭州)提供，(批号20030106)。ELISA试剂盒有英科新创(厦门)科技岁有限公司提供，(批号20030102)。酶标仪为美国伯乐公司550型，洗板机为北京普朗新技术有限公司DN一9620型。
1.3 方法 ：202份标本均用金标法和ELISA法平行检测两对半，按说明书操作。再对ELISA检测阳性和金标法检测阴性的标本用ELISA双空复查，其中任一孔S/Co≥１确定为阳性［4］。1.4 结果判断： 胶体金测试卡采用免疫层析法,其中HBsAg、HBeAg采用双抗体夹心法,HBsAb采用双抗原夹心法,HBeAb、HBcAb采用竞争抑制法,按说明书要求操作。阳性结果判断HbsAg、HBsAb、HbeAg测试卡的试纸条分别出现检测线和质控线,HBeAb、HbcAb测试卡的试纸条只出现质控线,测试卡未出现质控线为失效，分时统计结果显示时间，且所有结果必须在30分钟内报告完毕。ELISA所有标本均用SM-3型自动酶联免疫系统分析仪检测。HBsAg、HBsAb、HBeAg样本OD值S/CO≥1为阳性,反之为阴性;HBeAb、HBc Ab样本OD值S/CO≥1为阴性,反之为阳性。2 结果：见表1 100例HBsAg阳性标本中ELISA检测全为阳性，金标法检测7例为阴性，符合率为93%，ELISA双空复查结果为阳性，胶体金测试卡检测HBsAb、HbeAg的符合率为100%,8例HBeAb阴性,符合率92%,4例HbcAb阴性,符合率96%。结果见表1。表2 100例HbsAg阴性标本两种方法检测结果。ELISA检测得3例阳性，符合率为97%，HBsAb基本符合，只是ELISA检测HBsAb有的出现弱阳性，不作为考虑范围，其他结果均相同。
3讨论：胶体金测试卡检测单个标本的时间明显比ELISA时间短,因为高浓度的抗体(或抗原)集中固定在纤维素的微孔中,待测抗原(或抗体)流经微孔与固定的抗体(或抗原)接触,很快完成反应,通过目测胶体金标记物得到直观的显色效果。ELISA检测抗原(或抗体)在液相中经扩散作用,逐渐与固相表面的抗体(或抗原)结合,同时标记抗体(或抗原)也需要此过程形成标记抗原抗体复合物,检测时间较长。胶体金测试卡成本高;ELISA成本比较低。胶体金测试卡不需要仪器设备和洗涤,易于操作,大大减少了污染机会;ELISA需洗涤和显色反应过程,中间环节多,较复杂。胶体金测试卡法不需要特殊设备,快速检测单个标本,易于观察结果,操作简便,特异性较高,能满足急诊的需要。但从实验结果表明,由于胶体金测试卡的原理及方法学差异,灵敏度和稳定性稍低于ELISA,线性范围也较窄;HbcAb、HBeAb和HBcAb试剂质量有待提高,不适于住院病人和献血员[4],特别手术病人的检测。ELISA由于测定灵敏、特异、操作简便、易于自动化且无放射性污染等诸多优点，使其成为不仅目前应用最广而且发展最快的一种免疫测定技术。
【参考文献】GICA法较ELISA法有许多优点。GICA具有快速、简便、准确和灵敏等特点；不需仪器，操作更加简便，操作时间仅需20～30min，结果易于判断，30min之内即可报告结果，强阳性标本数分钟即可显色；可最大限度地避免实验过程中各种因素对结果的影响并减轻操作人员的工作强度。另外可单独检测标本，尤受标本量少的一些基层医院和个体诊所的欢迎。特别是固相载体酶免疫技术与胶体金技术等的结合，使市场上出现了一大批适用于家庭及床旁检测的快速试剂盒，大大方便了人群的自我保健和临床的快速诊断［5］。[1]卢敏，陆志檬.乙型肝炎的研究进展．国外医学?流行病学传染病学分册，2005，32：58．[2] 李金明.乙型肝炎病毒血清标志物测定及结果解释的若干问题[J].中华检验医学杂志,2006,29(5):385～389.3 [3] 王健，闵福援．乙肝病毒血清标志物的检测方法及其临床意义．中华检验医学杂志，2005，28(1)：113－115．[4] 骆铁桥.胶体金免疫层析法不宜用于献血员乙型肝炎表面抗原检测[J].上海医学检验杂志,2001,16(5):267 5 王兰兰．临床免疫学和免疫检验，第3版.北京：人民卫生出版社，2004，94-97．
