组织或全血抽提基因组DNA裂解液配方_全血基因组dna的提取

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组织或全血抽提基因组DNA裂解液配方

裂解液配方： 10mM Tris-Cl(pH 8.0)、15mM NaCl、10mM EDTA(pH8.0)、0.4%SDS。200 μg/ml蛋白酶K（使用之前加入）。

（1）1M Tris-Cl(pH8.0)

800ml水中溶解121.1g Tris碱，待溶液冷却至室温后加入浓盐酸调节pH至8.0(约需42ml浓盐酸)，定容至1L，高温高压灭菌备用。（2）5M氯化钠

800ml水中溶解292.2g氯化钠，加水定容至1L，高温高压灭菌备用。（3）500 mM EDTA(pH8.0)

800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na。2H2O），磁力搅拌助溶，用NaOH调节pH至8.0（约需20g NaOH颗粒），定容至1L，高温高压灭菌备用。（EDTA二钠盐需要调节pH至8.0时才能完全溶解）。（4）10% SDS

900ml水中溶解100g SDS加热助溶，加浓盐酸调节pH至7.2，加水定容至1L，无需灭菌。

（5）蛋白酶K；

灭菌水配置成20mg/ml，-20℃保存备用。