环境生物技术作业朱楠楠_生物环境技术作业
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环境生物技术——PCR技术观后感
周日下午，我们学习了关于PCR技术的视频。对此我产生了以下几点感想。首先，简述下，我所理解到的PCR技术流程。
第一，PCR反应需要几个基本组成：
1、DNA模板（template），含有需要扩增的DNA片断。
2、2个引物（primer），决定了需要扩增的起始和终止位置。
3、DNA聚合酶（polymerase），复制需要扩增的区域。
4、脱氧核苷三磷酸（dNTP），用于构造新的互补链。
5、缓冲体系，提供适合聚合酶行使功能的化学环境。另外，PCR反应在热循环设备中进行。PCR仪可以将反应管加热或冷却到每步反应所需的精确的温度。为防止反应体系中液体产生蒸气，通常在反应管上加盖加热的盖子(比加热板温度来的高)，或者在反应体系表面加入一层石蜡油。第二，PCR的操作步骤。
1、利用高温(93-98℃)使双链DNA分离(熔解)。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前，通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离，仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟。
2、在DNA双链分离后，降低温度使得引物可以结合于单链DNA上(降温或称接合)。此阶段的温度通常低于引子熔点5℃。错误的黏合温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。新技术的融合型核酸聚合酶在此阶段的温度会高于熔点3~5℃，仅需时间5~10秒。
3、DNA聚合酶由降温时结合上的引子开始沿着DNA链合成互补链(延长)。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片断长度。传统的Taq估计合成1000bp大概需要1分钟、较新的Tbr(来自于嗜热菌Thermus brockianus)约40秒、融合型聚合酶仅约15秒。
以上就是PCR的主要内容。前人所做的这些让我技术让我联想到，科学的道路需要不断的探索的，需要有人突破，有人创新。我们现在学习的东西，都是为日后的研究作基础。观看视频不仅是为了学习前辈所发现的知识，更重要的是学习先者的探索精神和他们为科学所做的贡献，以此为榜样，为科学做贡献。
我们这代人，缺少那种刻苦钻研的精神与动力，那些刻苦都是书本上，网络上的道听途说，真正经历的才会有深刻的认识，所以我们应该学会利用这样的优越条件，让自己得到锻炼，为科学事业做点微薄的贡献。刻苦钻研做研究，学会坚忍不拔，坚强的毅力支撑我们一路走下去。
X11014048朱楠楠
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