外植体灭菌_外植体灭菌方法
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外植体灭菌
对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成,准备好消毒的烧杯、玻璃棒、酒精、消毒液、无菌水、手表等。用酒精浸10-30s。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用,加之酒精穿透力强,也很易杀伤植物细胞,所以浸润时间不能过长。有一些特殊的材料,如果实、花蕾、包有苞片、苞叶等的孕穗,多层鳞片的休眠芽等等,以及主要取用内部的材料,则可只用酒精处理稍长的时间。
升汞是由重金属离子汞来达到灭菌的,一般处理5-8min,用无菌水冲3-10次。
吐温是表面活性剂,主要作用使药剂更容易展布,更容易浸入到灭菌的材料表面。但吐温加入后对材料的伤害也在增加,应注意吐温的用量和灭菌时间。处理完的材料在无菌条件下,取用内部材料。
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