实验材料与试剂总结_高中生物实验试剂总结
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实验专题
常用方法技术与药品试剂
一、基本的实验方法和技术（补充）
1.植物叶片生成淀粉的鉴定技术（1）适用于光合作用的有关实验
（2）主要步骤：光照 酒精脱色加碘检验等 2.同位素示踪技术
（1）噬菌体侵染细菌实验
（2）光合作用中氧原子、碳原子转移的研究实验（3）半保留复制实验
（4）分泌蛋白的形成过程 3.植物杂交技术
（1）雌雄同花：花蕾期去雄 + 套袋 + 开花期人工授粉 + 套袋（2）雌雄异花：花蕾期雌花套袋 + 开花期人工授粉 + 套袋 4.育种技术
（1）杂交育种（2）人工诱变育种（3）单倍体育种（4）基因工程育种（5）细胞工程育种等。
二、实验中常用器材和药品的使用
1.斐林试剂与班氏试剂：可溶性还原糖的鉴定砖红色沉淀（水浴加热）2.双缩脲试剂：鉴定多肽（蛋白质）与双缩脲紫色
3.苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ：脂肪的鉴定（脂肪被苏丹Ⅲ染成橘黄色，被苏丹Ⅳ染成红色，用显微镜
观察；也可向待测样液中滴加）
4． 酒精：用于洗去浮色，配制解离液，叶片脱色，析出DNA（冷酒精），提取叶绿体中的色
素，消毒处理，冲洗卡诺是固定液。5.碘液：鉴定淀粉（蓝色）
6． 吡罗红甲基绿（混合染色剂、现配现用）：甲基绿使DNA呈现绿色（细胞核，面积小），吡罗红使RNA呈现红色（细胞质，面积大）
7.HCl：改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；使染色质中DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合；解离；改变溶液pH
8.NaCl：配制生理盐水（0.9%的氯化钠溶液，维持动物细胞的正常形态）及其他不同浓度的盐溶液，可用于测定动物细胞内液浓度；溶解(2mol/L)或析出DNA（0.14mol/L）9.NaOH：用于吸收CO２或改变溶液的pH，模拟细胞大小与物质运输关系实验中应用
10.健那绿染液 ：专一染线粒体的活细胞染料（健那绿溶解在生理盐水中制成健那绿染液，使
活细胞中的线粒体呈现蓝绿色）
11.蔗糖：配制蔗糖溶液，用于测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原
12.台盼蓝：台盼蓝使死细胞染成蓝色（正常的活细胞，细胞膜结构完整具有选择透过性能够
排斥台盼蓝，区分活细胞和死细胞；检测细胞膜的完整性）
13.20%的肝脏研磨液、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁溶液：用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。
14.可溶性淀粉、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用
实验（应该用斐林试剂检测，不能用碘液进行检验，因为蔗糖及其水解产物与碘均不变色）15.3%可溶性淀粉、2%的新鲜淀粉酶溶液：探究温度对酶活性的影响（①先分别保温再混合，②不能用斐林试剂检测，只能用碘液检测，③不能用H2O2做本实验）
16.20%的肝脏研磨液、3%的过氧化氢：探究Ph值对酶活性的影响（不能用淀粉酶催化淀粉
探究探究Ph值对酶活性的影响）17.Ca(OH)2（澄清的石灰水）：鉴定CO２（混浊程度不同可说明有氧呼吸与无氧呼吸产生二氧
化碳的多少
18.溴麝香草酚蓝水溶液：可检测CO2（由蓝变绿再变黄）19．重铬酸钾溶液：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色（可
以检测酵母菌的呼吸方式，也可检验酒驾）20．乙醇或丙酮：用于提取叶绿体中的色素
21．层析液：可用于色素的分离，即将色素在滤纸上分离开。22.滤纸 ：过滤或纸层析
23.二氧化硅：在色素的提取和分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分
24.碳酸钙：研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏25.NaHCO3 ： 维持环境中CO２浓度的恒定
26.改良苯酚品红染液、龙胆紫染液、醋酸洋红溶液（碱性染料）：用于染色体染色
27.秋水仙素：阻断纺锤体的形成,使染色体加倍（人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或
幼苗，可使染色体组加倍，原理是可抑制纺锤体的形成）（低温也可抑制纺锤体的形成）28.卡诺氏液：把经诱导处理的根尖放入卡诺氏液中浸泡0.5-1h，以固定细胞形态 29.二苯胺：鉴定DNA（蓝色，沸水浴）30.柠檬酸钠：防止血液凝固，抗凝剂
31.洗涤剂：提取植物细胞中DNA时瓦解细胞膜 32.琼脂：激素的转移或配制固体培养基
33.PEG试剂：促融剂（灭活的病毒也可作为促融剂）34.氯化钙： 增大细菌细胞壁的通透性 35.胰蛋白酶（胶原蛋白酶）：可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散开 36.木瓜蛋白酶：嫩肉粉的主要成分，催化水解蛋白质
37.蒸馏水：①在观察DNA、RNA分布中配染色剂；缓水流冲洗载玻片
②质壁分离及复原实验中，使发生质壁分离的细胞浸浴在蒸馏水中发生复原（引流法）
③临时装片的制作（擦、滴、取、放、展、盖）④有丝分裂实验中漂洗解离液
⑤DNA粗提取与鉴定实验中使血细胞吸水涨破；稀释NaCl溶液 ⑥制备细胞膜时使细胞吸水涨破（引流法、差速离心法）
三．注意取材问题
(1)观察DNA、RNA在细胞中的分布不能选用哺乳动物成熟的红细胞(无细胞核，也就几乎不含DNA、RNA)；
(2)不能用观察叶绿体的材料来观察线粒体(叶绿体中的色素颜色会掩盖健那绿染色后的颜色变化)；
(3)观察细胞的有丝分裂或低温诱导植物染色体数目的变化时，应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞(长方形的细胞可能是根尖的伸长区或成熟区的细胞，没有分裂能力)；
(4)观察细胞的减数分裂所选的材料可以是动物的精巢和植物的雄蕊，而不宜选用动物的卵巢和植物的雌蕊(雄配子的产生数量远远多于雌配子，更容易观察到减数分裂的细胞)；
(5)观察叶绿体时，若选用菠菜叶则取稍带些叶肉的下表皮(靠近下表皮的叶肉细胞中的叶绿体较大而数目较少)；
(6)观察植物细胞的质壁分离与复原应选取活的成熟的植物细胞(含有大的液泡)。四．实验中注意问题 1.有关蛋白质的鉴定
①若用蛋清进行蛋白质鉴定时，需将鸡蛋清用水稀释，通常是0.5 mL蛋白液加入5 mL水，搅拌均匀。如果蛋白液稀释程度不够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不容易刷洗干净。
②鉴定蛋白质时，向样液中加入2 mL双缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入3～4滴双缩脲试剂B摇匀。其中双缩脲试剂B不能过量，因为过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，从而掩盖生成的紫色。
2.探究温度(pH)对酶活性的影响时，必须在达到预设的温度(pH)的条件下，再让反应底物与酶接触，避免在未达到预设的温度(pH)时反应底物已与酶接触发生反应，影响实验结果。
（1）温度对酶活性影响实验中
①不能用过氧化氢酶来完成此实验，因为过氧化氢受热易分解
②不能用斐林试剂检测，因为斐林试剂的使用需要加热，加热会改变0℃组的实验结果（2）pH对酶活性影响实验中：不能用淀粉、淀粉酶做此实验 3.探究酵母菌的呼吸方式时：
（1）①新配制的质量分数为5%的葡萄糖溶液先加热煮沸(杀死里面的微生物、除去溶液中的氧
气)，等冷却(防止高温杀死酵母菌)后再将食用酵母菌加入；
②酵母菌培养液应封口放置一段时间后，待酵母菌将瓶内的氧气消耗完，再连通盛有澄清石灰水的锥形瓶，以保证检测到的一定是酵母菌无氧呼吸产生的CO2使澄清的石灰水变混浊。
（2）实验结果的检测
①检测CO2（观察石灰水混浊的程度、溴麝香草酚蓝溶液变成黄色的时间长短）
②检测酒精的产生（酸性的重铬酸钾）4.探究生长素类似物促进插条生根的最适浓度
①装置的设计应有利于观察，如观察促进生根的实验可以用水培法。
②所设组别除不同浓度的生长素类似物处理外，还要增加一组蒸馏水处理的做空白对照。5.探究培养液中的酵母菌种群数量的动态变化
①从试管中吸出培养液进行计数之前，要轻轻震荡几次，使酵母菌均匀分布，以确保计数准确，减少误差。
②该探究不需要设置对照，因为随着时间的延续，酵母菌种群数量的变化，在时间上形成前后自身对照
③该探究不用重复，只要分组实验，求得平均值即可。
④对于压在小方格界线上的酵母菌，应只计算相邻两边及其顶角的酵母菌。⑤实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法是错误的，正确的方法是浸泡和冲洗。6.观察叶绿体、线粒体
①选用藓类的小叶或者菠菜叶的下表皮（稍带叶肉）作观察叶绿体的实验材料是实验成功的关键，因为藓类叶片仅为一层细胞，菠菜叶的下表皮的叶肉细胞叶绿体大且数目少，便于观察。）
②线粒体、叶绿体均需保持活性。
③叶绿体，不需染色，可直接观察；线粒体用健那绿染色（活体染色剂）
④观察线粒体一般选用动物或人体细胞，而不选用植物的叶肉细胞，其原因是经健那绿染
色的线粒体颜色为蓝绿色，与叶绿体颜色相近，会掩盖影响对对线粒体的观察
7.采用差速离心法的实验有
①细胞膜的提纯②分离各种细胞器
8.研究DNA的复制方式用（答案：密度梯度离心法、同位素标记法）9.引流法的应用
①细胞膜的制备②质壁分离与复原 10.紫色洋葱可做哪些实验
有丝分裂（根尖）、低温诱导染色体数目加倍（根尖）、质壁分离（洋葱鳞片叶外表皮）、观察DNA、RNA的分布（洋葱鳞片叶内表皮）、观察线粒体（洋葱鳞片叶内表皮）
11、植物种群密度调查用
蚯蚓（活动能力比较弱的动物）的种群密度调查用调查动物丰富度用 取样器取样法）
统计动物丰富度（目测估计法、记名计算法）
12、关注酵母菌的常考知识点和注意问题
（1）酵母菌是单细胞真菌，即属于真核生物（2）代谢类型异养兼性厌氧型（3）生殖方式无性生殖和有性生殖
（4）具有的核酸种类有DNA和RNA，其中遗传物质是DNA，是否遵循
遗传规律是（有性生殖）
（5）能发生的可遗传变异有基因突变、基因重组和染色体畸变（6）酵母菌不是种名，代表的是一类生物。
（7）在生态系统中的地位：大多数腐生，属分解者； 少数寄生，属消费者，如葡萄表面的野生酵母。
（8）有细胞壁但成分既不是纤维素和果胶（植物），也不是肽聚糖（细菌）。
