RNA提取注意事项总结_rna提取注意事项总结

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一、研钵的处理

一般用三蒸水洗净后，放干后用锡箔纸包好后置高温160-250度烘烤4小时左右，可以灭活所有的酶并杀灭细菌和真菌孢子，冷却后即可使用

那如果我有几十个标本的话，我每提一个就要消毒一次研钵？

是啊。你可以一次准备好几个研钵，一次做几个样。完了再用锡箔纸包上，高温消毒

老师您好，研钵最好在150摄氏度的烘箱中烘烤5-7小时，如您不急，可烘烤过夜，我们实验室的做法是：锡箔纸包好，直接180℃烘烤4个小时左右，之后再放入-20℃冰箱中预冷备用。

研钵最好用锡箔纸包好，放在180度烘箱中处理6个小时以上。

二、器械的处理

提取rna的所有器械均应经depc处理吗？

总之，1）.提取rna的所有器械最好先用DEPC处理，然后再高温灭菌；

2）.RNA提取尽量在低温条件下操作，同时整个过程尽量要迅速；

3）RNA提取出来以后立即-70度保存，如果暂时不用，可以保存在75%的酒精溶液中。

就个人经历浅谈一下

1）如果枪头和EP管是刚拆包的，就无需DEPC处理，处理后反而会破坏？硅化涂层？导致取液不准和挂液；镊子、装EP管的饭盒等要先用DEPC处理，然后再高温灭菌；

2）戴橡胶手套，常用95%的酒精擦手、离心机、实验时用到的EP管架和实验操作区域。不要对着实验区域说话；离心时不能完全按说明书上写的时间，如果离心完管里还有液体就再离心一会。

我觉得提取RNA的器械不必都用DEPC处理。我通常是这样做的：

1.枪头是DEPC处理，然后高压消毒。

2.EP管高压消毒即可。

3.包装样品用的锡箔纸和装试剂的瓶子高温（200度以上）烘烤4小时。

4.镊子、手术剪等器械用75%酒精消毒即可。

5.取材的时候要尽可能快，并迅速放进液氮。

6.保存RNA我通常用DEPC水，—70度保存。我提的RNA快一年了，依然很好。要说一句的是：我的低温冰箱曾经停电3、4天，竟然RNA没有怎么降解，呵呵！

我的经验是枪头不用DEPC水处理，但是要用新的；

EP管直接高压消毒，固体物质如瓶子、量筒先用DEPC水浸泡，然后高温干烤；

取材时不要说话。

三、