高二生物教研活动发言稿_免费教研活动发言稿
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高二生物教研活动发言稿
发言人：李玲萍
专题二微生物的培养与应用
【学习导航】
本专题包含三个方面的内容：
课题1.微生物的实验室培养；课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数；课题3分
解纤维素的微生物的分离。
课题1介绍了最基本的微生物技术，是开展其他两个课题的基础。课题2和课题3要求
分离某种特定的微生物，难度较大，探究性也更强。此外，本专题中所强调的无菌操作技术，将有助于“专题3植物组织培养技术”的顺利完成。
学生通过本专题的学习，应当掌握培养基、消毒灭菌等有关微生物培养的基础知识，应
当掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术，并可以运用相关技术解决生产生活中有关微生物计数、微生物分离与培养等实际问题。
课题1微生物的实验室培养
【导学诱思】
1．培养基的配制原则是。培养基可以分为和。
2．培养基一般都含有、、、四类营养物
质，另外还需要满足微生物生长对、以及的要求。
思考：为什么大多数培养基都需要含有四类营养物质？
3．获得纯净培养物的关键是。
4．避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：
5．消毒是指灭菌是指思考：消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么？
6．实验室常用的消毒方法是，此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如、等。常用的灭菌方法有、、，此外，实验室里还用或进行消毒。
7．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤是⑴，⑵，⑶，⑷，⑸。
思考：
⑴培养基灭菌后，需要冷却到50左右，才能用来倒平板。你用什么方法来估计培养基的温度？
⑵为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
⑶平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
⑷在倒平板的过程中，如果不小心瘵培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能
用来培养微生物吗？为什么？
8．微生物接种的方法中最常用的是和。
平板划线法是指。稀释涂布平板法是指。
9．平板划线的操作步骤如下：
⑴⑵⑶
⑷⑸⑹
⑺
思考：
⑴为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然
需要灼烧接种环吗？为什么？
⑵在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
⑶在作第二次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端开始划线？
10．系列稀释操作步骤：
⑴⑵⑶
11．涂布平板操作步骤：
⑴⑵⑶⑷
学案中【疑难点拨】
1．生物的营养
营养是指生物摄取、利用营养物质的过程。营养物质是指维持机体生命活动，保证发育、生殖所需的外源物质。
在人及动物，营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类；在植物，营养物质包括矿质元素、水、二氧化碳等三类；在微生物，则有水、无机盐、碳源、氮源及特殊营养物质五类。
2．培养基的制作是否合格
如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2天后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。
3．无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？
无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
4．平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
5．为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍
然需要灼烧接种环吗？为什么？
操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线
前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
【导学诱思】
1．尿素只有被分解成之后，才能被植物吸收利用。
2．以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象，要达到的两个主要目的是：
⑴；⑵。
3．PCR（）是一种在体外将。此项技
术的自动化，要求使用耐高温的DNA聚合酶。
思考：怎样找耐高温的酶呢？
4．实验室中微生物的筛选应用的原理是：人为提供有利于生长的条件（包
括等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
5．选择培养基是指。
6．常用来统计样品中活菌数目的方法是。即当样品的稀释度足够高
时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。另外，也是测定微生物数量的常用方法。
7．比较教材中两位同学的操作方法，哪位同学的结果接近真实值？你认为这两位同学的实验需要改进呢？如需要，如何改进？
8．一般来说，统计的菌落数往往比活菌的实际数目。这是因为。因此，统计结果一般用而不是活菌数来表示。
9．设置对照实验的主要目的是，提高实验结果的可信度。
10．对照实验是。
11．实验设计包括的内容有：、、和，具体的实验步骤以及时间安排等的综合考虑和安排。
12．不同种类的微生物，往往需要不同的培养和培养。在实验过程中，一
般每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以。
13．无菌操作应注意什么问题？
⑴⑵⑶
14．在进行多组实验过程中，应注意做好标记，其目的是。
思考：应标记哪些内容？怎样操作更有利于实验的进行？
15．对所需的微生物进行初步筛选，只是分离纯化菌种的第一步，要对分离的菌种进行
一步的鉴定，还需要借助的方法。
思考：有哪些方法可以对菌种进行鉴定？
学案中【疑难点拨】
1．选择培养基
选择培养基的含义是：在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。
在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点，如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉
菌。加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在培养的培养成分的基础上加入的。
培养基中的营养成分的改变也可达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏氮源时，可以
分离固氮微生物，因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。如石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分离能消除石油污染的微生物的目的。改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。
2．如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？
统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁栏的公式进行计算。
3．为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？
这是因为土壤中各类微生物的数量（单位：株/Kg）是不同的，例如在干旱土壤中的上层样本中：好氧及兼性厌氧型细菌数约为2185万，放线菌数约为477万，霉菌数约为23.1万。因此，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。
课题3分解纤维素的微生物的分离
【导学诱思】
1．纤维素是类物质，是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。
2．纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即、和，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成。正是在这三种酶的协同作用下，纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长提供营养，同样，也可以为人类所利用。
3．在做纤维素酶分解纤维素的实验过程中，如果没有摇床，可以采用何种方法代替？
4．筛选纤维素分解菌可以用法，这种方法能够通过直接对微生物进行筛选。
5．在土壤中取样的方法有：①；②。
6．刚果红是一种，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。
思考：
①怎样利用刚果红的这一特点来筛选纤维素分解菌？
②利用刚果红染色的方法有几种？各自的优缺点是什么？
7．分离分解纤维素的微生物的实验流程图如下：→→梯度稀释→→。
思考：⑴此流程图与样品的稀释和稀释液的取样培养流程图有何异同？
⑵为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？
⑶将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？
学案中【疑难点拨】
1．分离分解纤维素的微生物的实验流程与稀释液的取样培养流程图有何异同？
它们的区别是：稀释液的取样流程图是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。分离分解纤维素的微生物的实验流程通过选择培
养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本相同。
2．将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？
将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌的生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约10cm左右腐殖土壤中。
3．两种刚果红染色法的比较
刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过20年的历史，在本课题中我们给出了两种方法。方法一是传统的方法，缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色反应基本上纤维素分解菌的作用。方法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂的问题，缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊，因为培养基中纤维素占主要地位，因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。方法二的另一缺点是：有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。
4．为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？
在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。
