食用菌制种与栽培 教案_食用菌栽培制种篇

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食用菌制种与栽培 教案

实验一 食用菌形态结构的观察

一、实验目的认识和掌握常见的栽培的食用菌形态特征

二、实验原理

常见的栽培的食用菌主要是担子亚门层菌纲和腹纲的一些种类，它们由双核菌丝分化形成子实体，子实体是有性孢子着生的器官，其孢子外生在担子上，并聚集成一层子实层，但它们的子实体形状因种类不同而有很大差别，是认识食用菌类别的主要标志。

三、实验器材

1、新鲜的食用菌，浸、干制标本。

2、解剖刀。

四、实验方法

识别香菇、双孢蘑菇、平菇、猴头、口蘑、木耳、竹荪、草菇、银耳、金针菇等形态特征。取平菇、香菇，首先观察其子实体的组成部分及其形态特征。再用解剖刀纵切子实体观察其菇盖组成。菌肉的颜色、质地、菌褶形状和着生情况(离生、延生、直生、弯生)。再观察其菌柄的组成，菌柄的质地，中空或中实。

五、作业

绘制香菇子实体形态及纵剖面简图，并注明各部位名称。

实验二 食用菌母种培养基的制备与灭菌

一、实验目的1、掌握食用菌母种培养基的配制方法。

2、熟练掌握高压蒸汽灭菌锅的使用方法。

二、基本原理

培养基是按照食用菌生长发育所需要的各种营养物质，用人工方法配制而成的营养基质。其中含有碳源、氮源、矿质元素、生长因子和水分等物质。由于食用菌在生长发育过程中，还必须在适宜的酸碱条件下，才能表现最大的生活力。因此，对不同种类食用菌还须将培养基调节到一定的PH值范围。食用菌的培养基可分为母种培养基、原种培养基和栽培种培养基。对于母种培养基一般多采用固体培养基，因此需在培养基中加入一定量的凝固剂。

三、实验器材

马铃薯(去皮)200g，琼脂16-18g，葡萄糖20g，大试管、棉塞、灭菌锅、漏斗、铁架台、胶管。

四、实验步骤

1、选好马铃薯洗净去皮(挖去芽眼)，切成薄片，取200g放在铝锅中，加水1000mL，煮沸20分钟，双层纱布过滤，取滤液并补足水至1000mL，加琼脂，小火加热，玻璃棒搅拌至琼脂全部溶解，再加入葡萄糖使其溶化。调节pH至5.5~6.5。

2、分装试管。装入量为试管总长度的1/5，塞好棉塞。

3、灭菌。把包好的试管放入高压蒸汽灭菌锅内，121℃，灭菌30min。灭菌结束，趁热摆斜面。

实验三 母种的分离与培养

一、实验目的掌握食用菌组织分离法的方法步骤，制备出栽培用菌种。

二、实验原理

组织分离法是利用子实体组织来分离获得纯菌丝的方法。食用菌子实体组织，实际上就是菌丝体的扭结物，组织化了的纯菌丝，具有很强的再生和保持种性的能力。因此，只要在无菌的条件下切取一小块组织，移植到合适的培养基上，便能获得纯菌丝体。从生物的角度来讲，这是一种无性繁殖法。

采用组织分离培养，操作简便，取材广泛，只要新鲜，即使取其菌柄，也能分离培养成纯菌种。同时该方法的遗传性稳定，变异性小，是获得母种常用的一种方法。

三、实验器材

1、香菇子实体

解剖刀、解剖剪、镊子、试管斜面、75%酒精、酒精棉球、无菌水、培养皿、超净工作台

四、实验步骤

1、菌种的选择：选择肉厚肥大、鲜嫩、出菇早、菇形整齐、菌柄短且无病害的做种。

2、将种菇表面用清水冲洗干净，放在无菌室内进行表面消毒。用镊子将种菇放在培养皿内，用另一镊子夹75%酒精棉球对种菇进行表面消毒，然后移入另一培养皿内再用无菌水反复洗涤三次，洗净残留的消毒剂。

3、用解剖刀或解剖剪蘸酒精进行火焰消毒，冷却后把已消毒的种菇纵切开，然后在菌盖与菌柄交界处，切取长宽约0.3~0.5cm的菌肉组织块，用接种针移到斜面培养基上，置24℃恒温箱中培养。

4、每天检查试管斜面菌落生长情况，如从分离的菌肉组织块上长出正常的白色菌丝，即分离成功，及时将生长出来的菌丝转移新的试管斜面。若在组织块附近或其他地方出现其他颜色杂菌生长应予以淘汰。

实验四 食用菌原种培养基的制备、灭菌、接种和培养

一、实验目的1、了解食用菌原种常用培养基配方；

2、掌握食用菌原种制作方法。

二、实验原理

在无菌条件下，采用无菌操作技术，将母种接种到原种培养料上，经过适宜条件的培养，菌丝便可长满原种培养料袋（瓶）即成为原种。这利用了菌丝具有很强再生能力的特点，具有保持种性的能力。原种主要用于繁殖栽培种，以适应大面积生产的需要。

三、实验器材

1、三角瓶、广口瓶(250mL)

2、培养基

木屑78%、麸皮20%、蔗糖1%、生石膏2%、水115%

四、实验步骤

1、木屑拌料前先用1cm孔筛滤去木块和杂质，然后将麸皮、石膏倒入木屑中搅匀。

2、蔗糖用水溶化后，均匀加入拌料，料要拌匀，无生心现象。

3、检查含水量，以手握料成团落在地上散开，手用力握料指缝间应无水滴痕迹。

4、广口瓶装满料后，用小于瓶口的直弯头小铲压料，尽可能压实，料装至瓶颈部下方2cm处，然后用布擦瓶口内外残余木屑，塞上棉塞，放入灭菌锅中，1.5大气压条件下灭菌3h。

5、灭菌结束后，取出菌种瓶放入接种箱自然降温，瓶温低于30℃即可接种。

6、接种后的原种置于通风、干燥处，20~30℃环境下约40d发满瓶。

实验五 栽培种培养基的制备、灭菌、接种和培养

一、实验目的熟练掌握无菌操作技术，并掌握栽培种的制作方法。

二、实验原理

将原种按照无菌操作规程接到栽培种培养料上，经适宜条件培养长满瓶（袋）后即成为栽培种。这利用了菌丝有很强的再生能力的特点，具有保持种性的能力。

三、实验器材

1、三角瓶、广口瓶(500mL)

2、培养基

木屑78%、麸皮20%、蔗糖1%、生石膏2%、水115%

四、实验步骤

（一）准备工作

将经过灭菌的栽培种培养料袋（瓶），接种用的器具、原种等放入接种箱中。一般将待接的栽培种培养料袋（瓶）置于接种箱一端，袋横卧、瓶立码。然后用甲醛和高锰绝不能钾熏蒸处理以灭菌。

（二）接种

严格按照无菌操作规程进行。若原种为瓶装，瓶口应用75%酒精棉球擦拭，进行瓶口消毒。然后用火焰灭菌的接种工具清理原种表面的菌被，再将长满菌丝的培养料挖碎成粒（块）状。在酒精灯火焰边进行，效果更好。一般要瓶（袋）原种可接20~30袋栽培种。

（三）接好种后，将料袋（瓶）置培养室发菌，其条件要求与其相应的原种制作方法相同。由于栽培种的数量一般比较大，多利用自然温度发菌，这就要根据各种菌类对温度的要求，按照各地的实际情况，合理安排好制种季节，并采取相应的发菌管理技术措施。

实验六 平菇蜜饯加工技术