卵巢癌教案模板(精选5篇)_卵巢癌病历模板
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第1篇:分析发现滑石粉与卵巢癌之间的联系
分析发现滑石粉与卵巢癌之间的联系
对于许多女性来说,粉末喷粉有助于清新阴道区域。但一项新的研究表明,玉米淀粉为原料的产品可能是更好的选择。
欧迪玛veva研究人员表明,粉末可以从阴道区域迁移到卵巢,如果粉末含有滑石粉,可能略有增加卵巢癌的妇女的风险。
接触滑石粉是不太可能在卵巢癌最常见的一个主要因素,有没有足够的信息说清楚,是否有是一种因果关系。
滑石一种是矿物化合物,一种是类似于石棉;这两种矿物常常一起找到在地质构造中。在过去,一些滑石粉被发现含有石棉,但是现在的质量保证方案已最小化这种污染。
玉米淀粉,相比之下,在玉米籽粒中找到食物的物质。由于玉米淀粉的化学性质,它是生物学上难以置信它会导致癌症。
veva研究人员审查包括2000多名妇女使用了滑石粉或玉米淀粉为基础的产品在阴道区域卵巢癌的研究。一些使用的粉末灰尘卫生巾为好;在粉末某些存储隔膜或避孕套。
这些粉末可以通过输卵管卵巢,在那里他们可能引起卵巢肿瘤中发挥作用,是有争议的。在一些研究中,输卵管结扎与卵巢癌的风险降低挂钩。
卵巢癌的风险最高的之一是使用滑石粉和未接受绝育手术的妇女。引用许多研究,通过输卵管颗粒的迁移已被证明。既滑石粉和石棉在人类卵巢组织中已被发现。
大多数研究发现,增加卵巢癌风险与接触滑石粉功率相关联。
第2篇:卵巢癌患者术后的饮食护理总结
卵巢癌患者术后的饮食护理总结
卵巢癌患者术后的饮食护理总结,是针对卵巢癌患者术后可能出现的各种情况所作出的一些建议。由于手术会大量的损耗正气,所以如果护理得当的话,术后的恢复会事半功倍的。卵巢癌是女性生殖器官常见的肿瘤之一,发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌而列居第三位。那么面对如此的威胁,我们该如何去应对呢?下面我们一起来了解一下卵巢癌患者术后的饮食护理。
1、热量和蛋白质(蛋白质食品)供给应充足:可以多吃一些牛奶、鸡蛋、瘦猪肉、牛肉、兔肉、鱼肉、禽肉、豆制品等;卵巢癌化疗后饮食如患者厌食油腻荤腥,可选吃奶酪、鸡蛋饼咸鸭蛋等。平时还应多吃蜂蜜(蜂蜜食品),以及米、面等谷类食品。
2、多吃新鲜水果蔬菜:如油菜、菠菜、番茄、洋葱、芦笋、山楂、鲜枣、小白菜、猕猴桃、海带等。如恶心严重,可以进食菜汁,也可以吃些清爽的凉拌菜和水果。
3、多吃增强免疫力的食品:如香菇、银耳、黑木耳、蘑菇等,以及动物肝、鱼肝油、胡萝卜、莴笋叶等富含维生素A和胡萝卜素的食物。
4、合理安排三餐时间:卵巢癌化疗后饮食的早、晚餐应分别安排在清晨6时前、晚上7时后,延长用药和进食时间间隔,减少药物反应。避免用胡椒、芥末等刺激性调味品(调味品食品),以及邮件、熏烤食物。
5、注意饮水:每天不少于2000毫升,以减轻药物对消化道粘膜的刺激,促进毒素排泄。牛奶、豆浆和绿豆汤有助于排出癌细胞释放的毒物。
治疗肿瘤新突破——生物免疫疗法
我们运用山西省肿瘤医院的生物免疫治疗是人体的防御系统,发挥着清除体内发生突变的肿瘤细胞的作用。机体免疫系统和肿瘤细胞相互作用的结果决定了肿瘤的最终演变。
对于健康人来说,其免疫系统强大足以及时清除突变的肿瘤细胞;而对于癌症病人来说,其免疫监视功能低下、不能识别肿瘤抗原、或者不能递呈肿瘤抗原信号,从而使机体的免疫系统不 能对肿瘤细胞进行杀伤与清除,是肿瘤发生的主要原因。
机体发生肿瘤后,尽早手术切除是目前治疗肿瘤的第一选择,成功的手术可以切除肿瘤局部病灶,但肿瘤是全身性疾病,身体的其它部位及血液、淋巴中仍可能残留 众多的肿瘤细胞,会导致日后复发、转移。因此手术后或失去手术时机的患者,通常需要进行化疗或放疗。放疗、化疗能杀灭快速增殖的肿瘤细胞,但对残留的肿瘤 干细胞和其它处于非增殖期的肿瘤细胞无效。
另外,放、化疗没有靶向性,会同时杀死肿瘤细胞和正常细胞,病人免疫力会严重下降,生活质量很差。生物治疗是应 用生物技术,通过调节肿瘤患者机体的免疫防御机制(如白细胞介素、干扰素等细胞因子)或给予针对肿瘤细胞的物质(如单克隆抗体),从而能有效的清除病人体 内残存的肿瘤细胞,防止癌症复发转移,并能提高机体的免疫力,改善肿瘤患者的生活质量。因此,在肿瘤综合治疗方案中,肿瘤生物治疗成为最终提高肿瘤治愈率 和有效率的一个非常关键措施。
生物治疗是继手术、放疗和化疗之后发展起来的第四种肿瘤治疗模式,是21世纪最具前景的肿瘤治疗技术,代表着肿瘤治疗新的方向。
生物治疗的优势:
1.是一种个体化治疗。
2.特异性强,选择性清除肿瘤细胞而极少损伤正常细胞。
3.无明显毒副作用。
4.可以调节人体抗肿瘤免疫力。
5.生物治疗在患者经手术、放化疗后体内残留肿瘤细胞最少时更能显现其重要的治疗优势。
生物治疗的适应症:
从理论上来说,每一位肿瘤病人都可以从免疫治疗中获得益处。早期肿瘤病人由于机体免疫系统尚未受到肿瘤的严重影响,对免疫治疗的应答较好,疗效相对也会更 好。
它用于以下情况效果同样良好:
1.手术后患者,可防止肿瘤转移、复发。
2.放疗、化疗后患者的综合治疗。
3.无法进行手术、放疗、化疗的中晚期患者。
4.癌性胸、腹腔积液患者。
5.骨髓移植后或化疗缓解后的白血病患者。
以上就是对卵巢癌患者术后的饮食护理的总结,希望对各位有所帮助。卵巢癌对女性来说是一种极大的痛苦,易发生转移且预后差,因此术后的饮食护理是关键。如果护理得当,那么对于恢复会起到事半功倍的作用。
第3篇:子宫内膜癌教案
(理论教学)
课程名称: 妇产科学 课程类型:(1)
1、必修;
2、选修;
3、其它 授课对象: 临床专业(本科)04级1、2、4、5、6班 授课时间: 2007至 2008 学年 下 学期
计划学时: 102 学时(其中:理论 55,实验: 48)
任课教师:
所属学院: 临床学院 课程管理部门(教研室): 妇产科
课程名称:妇产科
教 材:《妇产科学》人民卫生出版社出版(出版社),乐杰 编著,2004年第 6 版 讲 授 人: 专业技术职务:副教授 学 历:本科 学 位:学士 讲授题目:子宫内膜癌
所属章节:第31章 计划学时:2学时 教学目的和要求:
1、掌握子宫内膜癌的定义。
2、掌握子宫内膜癌的病理、临床表现、临床分期、诊断、治疗及随访。
3、熟悉子宫内膜癌的发病因素。教学重点:
1、子宫内膜癌的病理、临床表现、临床分期、诊断、治疗。
2、子宫内膜癌的诊断方法。教学难点:
1、子宫内膜癌的病理、临床表现
2、子宫内膜癌的诊断方法 教学方法:课堂讲授 使用教具:多媒体 思 考 题:
1、子宫体癌的临床表现、诊断。
2、子宫体癌的临床分期及治疗。
参考资料:
《实用妇产科学》、《妇科肿瘤学》
子宫内膜癌
子宫体癌因多起源于子宫内膜腺体,故又称为子宫内膜腺癌。多见于绝经后妇女,发病高峰年龄为55~60岁。在我国子宫体癌的发病率,仅次于子宫颈癌及卵巢癌而居女性生殖器官恶性肿瘤的第3位。近年发病率有不断上升趋势。
一、病因
确切病因不明,可能因素有:
(一)长期接受雌激素刺激
此病多见于延迟绝经、功能性子宫出血、多囊卵巢、卵巢性腺间质肿瘤(如颗粒细胞瘤等)以及绝经后长期服用雌激素的妇女,说明长期接受内源性或外源性雌激素刺激子宫内膜而无周期性的孕酮抑制,可能是导致本症的因素之一。
(二)肥胖、糖尿病及高血压
此病多见于肥胖、糖尿病或糖耐量异常以及高血压妇女,有人称之为子宫体癌“三联症”。
(三)未婚、未育及少育
此病多发生于未婚、未育及少育者,可能与子宫内膜接受雌激素刺激时间较长有关。
(四)遗传
家族中妇女有癌肿史者,子宫体癌发生率也增加,说明此瘤可能与遗传有关。
二、病理
肉眼观察,癌组织可局限于子宫内膜(局限型),呈菜花样或息肉样;也可弥散于整个宫腔(弥漫型),此两型晚期均可侵犯肌肉。癌组织松脆质软,常伴出血坏死。
子宫体癌大多数为腺癌,少数在腺癌组织中出现局限性分化良好的鳞状上皮,称为腺角化癌,恶性度较低;也有腺癌中出现鳞状细胞癌,则称为腺鳞癌,恶性度高,预后差。
三、转移途径
子宫体癌的特点是生长缓慢,可较长期局限于宫腔内,转移途径以直接蔓延和淋巴转移为主,血行转移较少见。
(一)直接蔓延
早期沿子宫内膜扩散,可达宫颈、阴道,亦可达输卵管和卵巢,并可向肌层侵蚀,晚期甚至穿透浆膜层而种植于盆腔脏器表面。
(二)淋巴转移
此型转移较晚,宫体上部和宫底部的腺癌可沿阔韧带上部淋巴管转移至卵巢,并向上直拉引流至腹主动脉旁淋巴结,也可沿圆韧带转移至腹股沟淋巴结;子宫中段的腺癌引流至骼总及腰淋巴结;宫体下部的腺癌累及宫颈时,转移方式同宫颈癌,预后较差。也可以由于淋巴逆流而转移至阴道及尿道周围淋巴结,当子宫切除术后,除癌细胞直接种植于阴道外,也有经淋巴逆流转移至阴道顶端的可能,故此部位常见复发。
(三)血行转移
偶有经血流转移至肺、胸膜等远处器官者。
四、临床分期
目前多采用国际妇产科联盟(FIGO)1982分期法如下:
0 期:腺瘤样增生或原位癌,组织学所见疑为恶性癌变。
Ⅰ期:癌肿局限于子宫体
Ⅰa期宫腔深度≤8cm
Ⅰb期宫腔深度>8cm
按组织类型可将Ⅰ期再分为4个亚期:
G1高度分化腺癌。
G2中度分化腺癌,有部分实性区。
G3低底分化腺癌或完全未分化癌,实性无腺体。
G4未定级。
Ⅱ期:癌累及宫体及宫颈。
Ⅲ期:癌扩散到子宫外,但未超越真骨盆。
Ⅳ期:癌扩散到真骨盆以外,或累及膀胱及直肠的粘膜。
五、临床表现
(一)阴道出血 绝经后出现阴道持续性或不规则出血;尚未绝经者可有月经过多或不规则出血。
(二)阴道排液 少数病人在病变早期有水样或血性排液增加,晚期并发坏死感染时,可出现恶臭脓血分泌物。
(三)疼痛 一般仅发生在晚期,当子宫颈管被癌肿组织堵塞导致宫腔积血或积脓时,可出现下腹胀痛或癌瘤刺激宫缩而引起疼痛,晚期癌浸润盆壁时,可出现腰腿痛。
六、诊断
(一)病史 对绝经期延迟、不孕或生育稀少而多年不育者,或合并有肥胖、高血压、糖尿病之老年妇女,凡有下列情况之一者,应怀疑子宫体癌:
1.绝经前后不规则阴道出血,特别是绝经较长时间后又出现不规则阴道出血者;
2.生育期子宫出血久治不育者;
3.宫腔内有持续排液者。
(二)妇科检查 子宫大小正常或稍大而软,阴道及宫颈无明显病变,有时可见息肉样组织自宫颈口向外突出;当宫腔积血或积脓时子宫可显著增大并有囊性感;晚期可在子宫旁扪到转移结节或包块。
(三)分段论断性刮宫
先用小刮匙刮宫颈管,后探测宫腔深度并环刮宫腔,注意刮取两侧宫角组织。当刮出物多且呈豆腐渣样时,则子宫体癌可能性极大,应停止继续搔刮,以避免子宫穿孔、出血及癌肿扩散。将刮出物分别标明送病理检查。
(四)细胞学检查 从阴道后穹窿取材作涂片查瘤细胞,阳性率较低;从宫腔吸液中找癌细胞可显著提高诊断的准确率。
(五)宫腔镜检查 可直接观察子宫内膜病变,确定子宫体癌的定位、体积及生长情况,可判定有无宫颈转移,确定Ⅰ期或Ⅱ期癌。
七、鉴别诊断
如能及时作诊断性刮宫,诊断多无困难,但临床上需与下列疾病相鉴别。
(一)绝经期功能失调性子宫出血
(二)子宫粘膜下肌瘤或内膜息肉
(三)子宫颈管癌及子宫肉瘤
(四)老年性阴道炎
八、预防
由于确切病因不明,目前尚无预防良策。
对绝经期前后妇女不应滥用雌激素,当有必要使用时,应以短期、间断及小剂量为宜,并同时加用孕激素。
对有子宫体癌高危因素的妇女要提高警惕,当出现阴道流血时,应严密随访,以防发生子宫体癌。
九、治疗
应根据临床分期和肿瘤分化程度以及患者全身状况决定治疗方案。目前采用以手术治疗为主,并辅以放疗、激素及化学治疗。
(一)手术治疗
是治疗子宫体癌的主要方法,应根据临床分期来决定手术范围,行全子宫切除术或如广泛性子宫切除及盆腹腔淋巴清扫术。
(二)放射治疗
包括腔内照射及体外照射。单纯放疗仅用于晚期癌无法手术切除的患者,也用于年龄过大合并其他疾病不宜手术治疗的各期癌患者。对手术病人,可于手术前后加用放疗。
(三)孕激素治疗
高效孕酮类药对控制癌肿的发展有一定效果,现作为治疗子宫体癌的常规措施之一。当癌细胞中雌孕激素受体较多时,对孕激素治疗效果敏感,甚至有治愈者。但用药剂量要大,时间要长。长期应用孕激素治疗须定时检查肝功。
(四)化疗
一般认为疗效不佳。
十、预后
子宫体癌生长缓慢,加之诊断及治疗手段的改进,是妇科癌症中疗效较好的一种。其疗效和预后与癌的期别,腹腔液中有无癌细胞,癌细胞分化程度,浸润肌层深度,淋巴结转移情况以及治疗方法有关。一般统计Ⅰ期5年存活率为75%,Ⅵ期5%左右。
第4篇:《人琴俱亡》教案模板
学习目标:1、疏通文意,明确文言实词、虚词在文中的意思。
2、感受文章的内容,体会人物的心情和个性特点,感受兄弟亲情。
一、课堂学习
1、你认为课文中哪些语句最能表达子猷与子敬的兄弟之情?“弦既不调”说明了什么,你理解“人琴俱亡”的含义了吗?
2、王子猷是一个怎样的人?你喜欢这个人物吗?
3、课文描写子猷先是“了不悲” “都不哭”,后又写他“恸绝良久”,他前后的表现是否矛盾?为什么?
二、课外拓展:结合材料探究魏晋风度
材料一:《伤逝十二》郗嘉宾(郗超)丧,左右白郗公:“郎 丧”既闻不悲,因语左右:“殡时可道。”公往临殡,一恸几绝。
材料二:《雅量谢公》东晋名相谢安的侄子在前线与八十万秦兵作战,这一战关乎国家危亡,大胜后派人急来报捷。谢安当时正与客人下棋,看完后若无其事的继续与客人慢慢下棋,客人问起也只淡淡地说小儿辈破大敌了。——这一战关系到国之兴亡、家之存绝,谢安不可能真的无动于衷,只是越是激动的重要时刻越平静,才是超脱的风度。
明确:《人琴俱亡》是《世说新语伤逝》第十六篇,结合其余十八篇来看,《人琴俱亡》作为其中一篇还是较为集中的体现了魏晋时期文人士大夫的某种思想性格特点及其文化特征——在任由性情、不拘矩度、注重情感的个性表达的同时,还故作旷达追求一种超脱的风度,魏晋风度。所以子猷的不悲不哭正好体现了魏晋时代士人独特的思想情感追求——他们注重真性情,追求个性的自由飞扬,同时又力求能摆脱世俗的一切利害得失、荣辱毁誉,寻求一种超然的风度。为此,尽管子敬很悲痛,却还是要强自抑制。
二、课后学习:阅读下面的文言文,完成题目。
(甲)王子猷、子敬俱病笃,而子敬先亡。子猷问左右:“何以都不闻消息?此已丧矣。”语时了不悲。便索舆来奔丧,都不哭。
子敬素好琴,便径入坐灵床上,取子敬琴弹,弦既不调,掷地云:“子敬子敬,人琴俱亡。”因恸绝良久。月余亦卒。
(乙)魏武将见匈奴使,自以形陋,不足雄远国,使崔季硅代,帝自捉刀立床头。既毕,令间谍问曰:“魏王如何?”匈奴使答曰:“魏王雅望非常;然床头捉刀人,此乃英雄也。”魏武闻之,追杀此使。
1、给下列字注音
猷()笃()恸()舆()
2、解释加点词的含义。
王子猷、子敬俱病笃()()子敬素好琴()
何以都不闻消息()()此乃英雄也()
3、用现代汉语疏通下列句子的意思,加点字的意思要力求译准。
(1)语时了不悲。
译文:____________________________________________________________
(2)便索舆来奔丧。
译文:____________________________________________________________
(3)便径入坐灵床上。
译文:____________________________________________________________
(4)因恸绝良久,月余亦卒。
译文:____________________________________________________________
4、曹植有一首《七步诗》,和(甲)文都是写 的,请你把它工整地写在下面。
5、(甲)(乙)两文都选自《世说新语》,(乙)文中的魏武就是曹操。文中的他是怎样的形象?
第5篇:外周血循环DNA作为生物标志物在卵巢癌临床中的应用研究
外周血循环DNA作为生物标志物在卵巢癌临床中的应用研究试验方案
试验目的:外周血循环游离DNA作为生物标志物在卵巢癌临床应用的价值
试验类别:诊断试验
申办单位:苏州大学
研究单位:苏州大学附属第二医院
试验负责人:李凯
主要研究者:张荣
试验日期:2012年11至2017年11月
联系人:张荣
电话:0512-67784769
一、临床试验背景
卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤之一,卵巢癌的死亡率居妇科肿瘤首位。70% 的患者发现时已是晚期(Ⅲ期和Ⅳ期),虽经积极治疗,5 年生存率也仅为15%~20%,若早期(Ⅰ期)发现,5 年生存率可达77% ~87%,若为分化良好的Ⅰ期患者,5 年生存率可达到94%[1]。因此,提高生存率的关键是早期诊断。特异而敏感的肿瘤标记物在辅助诊断卵巢癌中起重要作用。
近年来检测肿瘤患者外周血中游离DNA 的改变为肿瘤的早期诊断和复发监控提供了一种新的手段。游离DNA可存在于血浆或血清、脑脊液及滑膜液等体液中,是指一种游离于细胞之外的DNA,其中血液中的相应成分又称循环游离DNA或循环DNA。早在1947年Mandel等[2]就发现了人的血液循环中存在游离DNA。自1977 年leon等[3]发现肿瘤患者的血浆DNA 含量明显高于正常人后,关于肿瘤患者血中游离DNA的研究逐渐成为人们关注的热点。对游离DNA的定性研究显示, 肿瘤患者的血浆DNA 具有与肿瘤细胞DNA一致的基因异常[4-7]。
通过研究发现,原癌基因的突变,抑癌基因甲基化改变和微卫星不稳定性改变[8-9],可以预测肿瘤患者的预后[10]。目前国外对血中游离DNA的研究多集中在肺癌、直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、黑色素瘤等西方国家的“多发病”上,对卵巢癌的研究不多。Hagiwara等[11]对肺癌吸烟与不吸烟患者及健康人的游离DNA 分别进行了p53基因编码子248和249的突变检测,认为吸烟者游离DNA中p53基因突变可作为癌症的预测指标。Ryan等[12]对大量结肠癌患者的游离DNA研究表明,游离DNA中k-ras 基因突变的患者肿瘤复发率可达62.5%。欧洲癌症和营养学前瞻性队列研究收集了准健康者至其癌症发生后的游离DNA,进行了k-ras基因12位编码子和p53基因的突变检测,这一系列研究包括膀胱癌、肺癌、上消化道癌等,研究发现在肿瘤得到临床诊断前18.3个月,在血中游离DNA中就可检测到相应的基因突变,这种可预测性与肿瘤原发部位、类型和分期相关。
Frattini等[13]表明,游离DNA 定量、定性及定点的联合检测将提高肿瘤的临床诊断率。该研究观察了大肠癌患者手术前后的游离DNA 水平和游离DNA中k-ras和p16 的变化,发现术后游离DNA 水平逐渐下降,当肿瘤复发时快速升高,并重新可以检测到突变的k-ras和p16基因的甲基化。Melnikov[14]等用甲基化特异性PCR检测了卵巢癌患者手术的肿瘤组织和血浆中的甲基化差异,发现将BRCA1、HIC1、PAX5、PGR、THBS1基因合并检测,诊断卵巢癌的敏感性为85%,特异性为61%,其效率与直接应用肿瘤组织相当。Dobrzycka[15]等用PCR-RFLP的方法评价了血浆游离DNA与卵巢癌进展的关系,发现游离DNA的增加与肿瘤生存率降低有关。根据以上研究结果,我们希望可以通过类似的研究,发现卵巢癌患者游离DNA水平和相关基因的改变,获取相关中国人群血中游离DNA与卵巢癌病理变化的关系,为卵巢癌防治提供参考,并通过量化相关指标,提供可供复发监控的基因诊断方法。
目前研究充分表明了游离DNA 的变化与卵巢癌的关系密切。游离DNA 的发现及研究为疾病的非创伤性诊断、监测提供了可能,解决了肿瘤基因检测只能用肿瘤组织的标本限制,为肿瘤的诊断、治疗监控、预后随访等研究提供了简便途径。但是,由于游离DNA的微量存在,使得目前DNA 的提取比较困难,提取试剂昂贵。游离DNA 的检测方法不一,各自敏感度差异较大,游离DNA 检测的特异性低。因此,为方便游离DNA 的临床使用,需要建立实用性较强的检测方法。
本试验拟利用高保真DNA聚合酶的作用下巢式PCR和甲基化特异性的荧光定量PCR 检测游离血中游离DNA浓度,比较卵巢癌患者、卵巢良性囊肿患者、健康女性中血浆游离DNA 浓度的差别,并检测血中和卵巢癌手术标本中热点基因甲基化状态,以期发现外周血DNA的与卵巢癌组织的相关性。展望未来,卵巢癌游离DNA 的基础及临床研究必将成为受人瞩目的研究热点。
二、试验目的评价血浆游离DNA作为生物标志物在卵巢癌诊断及预后方面的意义。
三、试验设计
本试验为回顾性队列研究。
四、受试者的选择和退出
1.入组标准: 年龄:20-80岁。性别:女。1)卵巢癌组:
具有病理学诊断依据的新发卵巢癌病例。签署知情同意书。2)良性卵巢囊肿组:
手术病理确诊的良性卵巢囊肿的病例。签署知情同意书。
2.排除标准:
1)合并其他恶性肿瘤患者。2)妊娠。
3)合并自身免疫性疾病。
3.受试者中途撤出标准。
1)研究者从医学角度考虑受试者有必要中止试验。2)患者自己要求停止试验。
五、病例数及分组方法
分为卵巢癌组、良性卵巢囊肿组及健康对照组。运用队列研究,卵巢癌组样本量50例,良性卵巢囊肿组50例,健康对照组50例。
六、临床试验步骤:
(一)收集标本 1.卵巢癌组
1)患者术前采集肘静脉血6ml,用EDTA抗凝。
2)术中取新鲜卵巢癌组织标本1*1*1cm3,置-80℃冰箱中保存。
3)卵巢癌患者于术后1周采血查血游离DNA浓度及完整性。之后按卵巢癌的随访标准,术后第一年每个月随访一次,术后第二年每三月随访一次,术后第3年每半年随访一次,术后第4、5年每年随访一次。每次随访时查血游离DNA浓度及完整性、血常规、生化常规,血CA-125,视临床情况行影像学或妇科彩超检查。共随访5年。
2.良性卵巢囊肿组:
1)患者术前采集肘静脉血6ml,用EDTA抗凝。
2)术中取新鲜卵巢良性囊肿组织标本1*1*1cm3,置-80℃冰箱中保存。
3)良性卵巢囊肿的病人于术后一月和术后半年各随访一次,以后每年随访一次,共随访5年。每次随访时测血浆游离DNA浓度及完整性、血CA-125,视临床情况行影像学或妇科彩超检查。
3.健康对照组:
采集肘静脉血6ml,用EDTA抗凝,测血浆游离DNA浓度及完整性。每年随访一次,共随访5年。
(二)血浆游离DNA浓度及完整性的检测 1.标本采集后2 h内送实验室。
2.常温下3000r/min离心10 min,小心吸取上清血浆转移至3 ml离心管中,3000r/min离心10 min,吸取上清,置-80℃冰箱中保存。
3.解冻血浆,血浆DNA抽提采用QIA amp Blood Mini Kit(Qiagen公司),按说明书进行。4.游离DNA浓度及完整性测定:根据文献中给出的ALU基因的序列设计两对引物,一对引物为文献中已经给出的引物,扩增115bp长度,另一对引物自己设计,扩增长度为219bp,均由由上海生工合成。115bp:ALU 115-1:CCTGAGGTCAGGAGTTCGAG,ALU 115-2:
CCCGAGTAGCTGGGATTACA。219bp: ALU 219-1:CACGCCTGTAATCCCAGCACTTT,ALU 219-2:ATCTCGGCTCACTGCAACCTCC。以提取的血浆DNA为模板,进行PCR扩增。以试剂盒内已知的标准品浓度可计算出实验标本的游离DNA浓度。计算血浆游离DNA完整性:血浆游离DNA完整性=ALU219-qPCR/(ALU115-qPCR+ ALU219-qPCR)。5.检测血中和卵巢癌手术标本中热点基因甲基化状态:利用高保真DNA聚合酶的作用下巢式PCR的方法,根据肿瘤相关基因(根据相关文献和NCBI中的序列信息)设计引物,做巢式PCR(高保真酶),将得到的PCR产物测序。根据测序结果再设计引物,进行甲基化特异性荧光定量PCR,提取健康人的、卵巢良性囊肿患者、卵巢癌患者手术前后的血浆游离DNA做模板,两端设计引物做荧光定量PCR,看不同组之间的游离DNA甲基化的数量是否有显著性差异。
6.随访观察:三组实验对象于随访期内定期抽血检测血浆游离DNA浓度及完整性。
(三)观察指标
各组血浆游离DNA浓度及完整性、卵巢癌相关基因甲基化状态。
七、统计分析 本试验统计分析选用符合方案数据集,即所有符合试验方案要求的受试者数据进行统计分析。采用Dunnett’s 多组对比、t检验、Spearman’s相关性(一致性)检验、ROC曲线分析和多分类 logistic回归双侧检验。
八、试验段质量控制和保证
本研究过程中,将由申请者指派的临床监查员定期对研究医院进行现场监查访问,以保证研究方案的所有内容都得到严格遵守和填写研究资料的正确。参加研究人员必须经过统一培训,统一记录方式与判断标准。整个临床试验过程均应在严格操作下进行。研究者应按病例报告表填写要求,如实、详细、认真记录CRF中各项内容,以确保病例报告表内容完整真实、可靠。临床试验中所有观察结果和发现都应加以核实,以保证数据的可靠性,确保临床试验中各项结论来源于原始数据。在临床试验和数据处理阶段均有相应的数据管理措施。
九、伦理学要求
本临床试验必须遵循赫尔辛基宣言和中国有关临床试验研究规范、法规进行。在试验开始之前,须经苏州大学附属第二医院伦理委员会批准认定该试验方案后方可实施。每一位患者入选本研究前,研究医师有责任以书面文字形式,向其或其指定代表完整、全面地介绍本研究的目的、程序和可能的风险。应让患者知道他们有权随时退出本研究。入选前必须给每位患者一份书面患者知情同意书(以附录形式包括于方案中)。研究医师有责任在每位患者进入研究之前获得知情同意书,并以研究档案保留其中。
资料保存:使用后销毁
参考文献:
[1] Vergot e I, De Brabant e J, Fyles A, et al.Prognostic importance of degree of differentiation and cyst rupture in stage Ⅰ invasive epithelial ovarian carcinoma [J].Lancet, 2001, 357(9251): 176-82.[2] Mandel P, Met ais P.Les acides nucleiques du plasma sanguinchez I, home [J].C R Acad Sci Paris, 1948, 142: 241-43.[3] Leon SA, Shapiro B, Sklaroff DM, et al.Free DNA in the serum of cancer patient s and the effect of therapy [J].Cancer Res, 1977, 37: 646-50.[4] Mirza S, S harma G, Prasad CP, et al.Promoter hypermethylation of TMS1, BRCA1, Eralpha and PRB inserum and tumor DNA of invasive ductal breast carcinoma patients [J].Life Sci, 2007, 81(4): 280-7.[5] Weaver KD, Groman SA, Herman JG.Methylated tumor specific DNA as a plasma biomarker in patients with glioma [J].Cancer Invest, 2006, 24(1): 35-40.[6] Yang H J, Liu V W, Wang Y, et al.Detection of hypermethylated genes in tumor and plasma of cervical cancer patients [J].Gynecol Oncol,2004, 93(2): 435-40.[7]Sanchez-Cespedes M, EstellerM, Wu L, et al.Gene promoter hypermethylation in tumors and serum of head and neck cancer patients[J].Cancer Res, 2000, 60(4): 892-95.[8] Anker P, Stroun M.Circulating DNA in plasma or serum [J].Medicina(B A ires), 2000, 60(5Pt2): 699-702.[9] Shapiro B, Chak rabarty M, Cohn EM, et al.Determination of circulating DNA levels in patients with benign or malignant gastro intestinal disease[J].Cancer, 1983, 51(11): 2116-20.[10] Sozzi G, Conte D, Mariani L, et al.Analysis of circulating tumor DNA in plasma at diagnosis and during follow-up of lung cancer patients[J].Cancer Res, 2001, 61(12): 4675-8.[11] Hagiwara N, Mechanic LE, Trivers GE, et al.Quantitative detection of p53mutat ions in plasma DNA from tobacco smokers[J].Cancer Res, 2006, 66(16): 8309-17.[12] Ryan BM, Lefort F, M cmanus R, et al.A prospective study of circulating mutant KRAS2 in the serum of patients with colorectal neoplasia strong prognostic indicator in postoperative follow up [J].Gut, 2003, 52(1): 101-8.[13] Frattini M, Gallino G, Signoroni S, et al.Quantitative and qualitative characterization of plasma DNA identifies primary and recurrent colorectal cancer [J].Cancer Lett, 2008, 263(2): 170-81.[14]B.Dobrzycka, S.J.Terlikowski, M.Kinalski, et al.Circulating free DNA and p53 antibodies in plasma of patients with ovarian epithelial cancers[J]Ann.Oncol.2011,22: 1133-40.[15]A Melnikov, D Scholtens, AGodwin, et al.Differential Methylation Profile of Ovarian Cancer inTiues and Plasma [J].J Mol Diagn.2009, 11(1):60-5.