高二生物《基因工程》教学设计_高二生物教学设计
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课题:基因工程的操作工具
授课教师:北京师范大学附属实验中学 王卫红
一、教学目标 知识目标:
简述基因工程操作的基本工具;
说明限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体在基因工程操作中的作用。能力目标:
动手模拟限制性内切酶的酶切作用和DNA连接酶的连接作用。情感态度价值观目标:
体验科学研究中技术手段的进步对科学研究的巨大推动作用; 体验科学研究的思路和方法。
二、教学重点
限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体在基因工程操作中的作用
三、教学难点
限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体在基因工程操作中的作用
四、教学资源
浙科版《选修3:现代生物科技专题》、自制教学PPT、纸质模型
五、教学过程
1. 情境导入:
演示药物胰岛素图片,说明胰岛素是很多的糖尿病患者最好的药物,每天要注射胰岛素来维持血糖的平衡,曾经胰岛素是从动物胰脏中提取的,几吨的胰脏只能提出几十克胰岛素,所以曾经胰岛素是非常昂贵的药物,但是在科学技术飞速发展的今天,情况早已经发生了变化,人们通过基因工程将基因导入大肠杆菌细胞中来生产胰岛素?如何生产? 这也是基因工程的基本内容,基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。但是如何完成这个操作过程?将胰岛素基因叫目的基因,被导入的细胞叫受体细胞。
2.提出问题分析基因工程操作中需要哪些工具: 提出问题:1.如何获得人胰岛素基因?
2.能否将人的胰岛素基因直接注入大肠杆菌细胞?
提供材料:原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵,但是,生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制,以防止外来病原物的侵害。当外源DNA侵入时,会利用一种酶将外源DNA切割掉,以保证自身的安全。
通过分析明确:1.DNA分子要被被切成片段后导入受体细胞。
2.导入受体细胞需要有运载体,否则会被切断或破坏
针对以上问题,在基因工程的操作水平有相应的分子工具应该包括,分子剪刀、胶水和运载体。
3.了解三种工具:
3.1 限制性核酸内切酶:1970年Smith等分离并纯化了限制性核酸内切酶Hind II,1972年,H.W.Boyer等相继发现了EcoR I 一类重要的限制性内切酶。科学家们发现的这些酶,可以剪断外来的DNA分子,即上述内容中提到的酶,作用是防御外来DNA入侵,这类酶对基因工程的操作有没有作用呢?可以作为剪刀!限制性核酸内切酶,在科学家的继续研究中发现了几千种酶,而且能识别特定序列,并在特定位点进行切割,如GAATTC序列,在G、A之间切开。
切开什么位置?复习DNA的分子结构,回忆磷酸二酯键,被切开后什么样?
活动1:用EcoR I酶切开有两个GAATTC的纸质DNA分子 讲解粘性末端和平末端
活动2:提供两个不同序列的纸质运载体DNA,选择哪个?为什么?学生选择后切开。如果和运载体连接的话怎么办?运载体被相同的酶切开相同的切口再黏上,黏什么键?磷酸二酯键
3.2 DNA连接酶: 1967年,世界上有五个实验室几乎同时发现DNA连接酶,特别是1970年H.G.Khorana等发现的T4 DNA连接酶具有更高的连接活性。
分析DNA连接酶和DNA聚合酶的不同,DNA连接酶,连接的部分为磷酸二酯键,DNA聚合酶连接的也是磷酸二酯键,两种酶的作用有何不同?DNA连接酶:连接两个片段之间的缺口,不需要模板;DNA聚合酶:将一个个单个的核苷酸接上去,需要模板(画简图)
3.3 运载体:
通过上述活动分析,什么样的DNA适合做运载体?应该有多种限制酶切点,在宿主细胞中稳定保存,可复制,有标记基因,便于筛选。常用的运载体是细菌质粒和噬菌体DNA。
4.归纳笔记
六、板书设计
二、基因工程
1. 基因工程的操作工具
(1)限制性核酸内切酶
分布:主要在原核生物中
作用特点:识别特定核苷酸序列,切割特定切点
切点:磷酸二酯键
举例:EcoRI限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开(2)DNA连接酶——“针线”
DNA连接酶:连接两个DNA分子片段间的磷酸二酯键
DNA聚合酶:连接一个脱氧核苷酸到DNA片段上,需要模板(3)运载体——“运输车” 载体必须具备的条件:
1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存;
2、具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接;
3、具有某些标记基因,便于进行筛选。(如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等)
常用的载体有:质粒,噬菌体,动植物病毒等
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