从菠菜中提取叶绿素实验报告
第1篇:从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇
从菠菜中提取叶绿素实验报告一
【实验目的】
1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质的分离提纯与方法。
2、通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
【实验原理】
叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg };胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯,有三种异构体;叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。当提取时,从上到下颜色依次为:黄绿色,蓝绿色,黄色和橙色。
【实验仪器】
研钵,色谱柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化铝,菠菜叶,烧杯,漏斗,玻璃棒,滤纸,剪刀,脱脂棉,纱布。
【实验步骤】
1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨,研磨时放入少量碳酸钙,防止研磨过猛破坏叶绿素结构,研磨至烂。
2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,盖上表面皿,防止有机溶剂蒸发。按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。
3、浸泡期间,填充色谱柱,在最下面垫入脱脂棉,再盖上一个小滤纸片,装入氧化铝至4/5处,再盖上一层滤纸片。
4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中,转入分液漏斗,加入10mL水洗涤,除去水层(下层),再用10mL水洗涤一次。
5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中,加几滴丙酮既可以看到颜色变化。
6、洗净仪器,收拾实验室,打扫卫生。
【实验记录】
虽然分层现象不是非常明显,但是还是可以看得见分层现象。
【结果与讨论】
1、做这个实验的时候,我觉得不应该用纱布挤干,因为个人感觉很多色素都被
纱布吸走了,导致后来的实验现象没有很明显,经过对比,没用纱布直接过滤的同学做出的现象比用纱布做的现象要明显的多。
2、有机溶剂往往比较容易挥发,所以加入后要盖上表面皿。
3、此实验浸泡15分钟以后现象就可以很明显,因此以后在课堂上给学生演示的时候浸泡的时间不是越长越好的,15分钟足矣。
4、若最后颜色没有明显的分层,可以加入几滴丙酮帮助分层。
从菠菜中提取叶绿素实验报告二
绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg)),差别仅是a中一个甲基被b中的甲酰基所取代。它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂,也是食用的绿色色素,可用于糕点、饮料水等中,添加于胶姆糖中还可消除口臭。植物中a的含量通常是b的3倍。尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于石油醚等一些非极性溶剂。
胡萝卜素(C40H56)是具有长链结构的共轭多烯。它有三种异构体α—,β—,和γ—胡萝卜素,其中β—异构体含量最多,也最重要。生长期较长的绿色植物中,异构体中β—的含量多达90%。β—具有维生素A的生理活性,其结构是两分子维生素A在链端失去两分子水结合而成。生物体内,β—体受酶催化氧化即形成维生素A。目前,β—体可作为维生素A使用,也可作为食品工业的色素,β一胡萝卜素还有防癌功能。
叶黄素(C40H56O2)是胡萝卜素的羟基衍生物,在光合作用中能起收集光能的作用。在绿叶中通常是胡萝卜素的两倍。较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。 由此可见,叶绿素等天然色素有广泛的用途,对于色素的提取与分离就显得很重要了.本实验就提取和分离做了相关的研究。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
仪器:研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱(20×10 cm)、UV-240
紫外分光光度计
试剂:石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无
水硫酸钠、硅胶G、中性氧化铝(150目~160目)
1.2 提取与分离
1.2.1 浸泡法提取色素
在研钵中放入20 g新鲜的菠菜叶,加入20 mL3:2(体积比)石油醚—乙醇混合液,适当研磨(不要研成糊状,否则会给分离造成困难),用倾析法将提取液转
移到分液漏斗中,每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。洗涤时要轻轻旋荡,以防乳化。弃去水乙醇层,石油醚层用无水硫酸钠干燥,干燥后滤入小圆底烧瓶,在水浴上蒸发浓缩至大约l m L。
1.2.2 薄层层析
取四块显微载玻片,硅胶G经0.5%羧甲基纤维素钠调制后制板,在室温下晾干后在110°C活化1h。选取效果最好的一块进行点样。
展开剂:(1)石油醚—丙酮=8:2(体积比)
(2)石油醚—乙酸乙酯=6:4(体积比)
取活化后的层析板,点样,放入预先选定展开剂的广口瓶。瓶的内壁贴一张高5cm,绕周长4/5的滤纸,下部浸入展开剂中,盖上瓶盖。待展开剂上升至规定高度时,取出层析板,晾干,做出标记。
分别用两种展开剂展开,比较不同展开剂的展开效果。观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小。注意更换展开剂时,需干燥层析瓶,不允许前一种展开剂带入后一系统。
1.2.3 柱层析
取少量脱脂棉在小烧杯中用石油醚浸润后,挤压除去气泡,放在层析柱底部。在层析柱中加15cm石油醚。加入中性氧化铝8克,打开柱下活塞,保持石油醚高度不变,氧化铝在柱子中堆积。装完后,打开下端活塞,放出溶剂,直到氧化铝表面剩下1—2mm高为止(不能使氧化铝表面露出液面)。
将浓缩液用滴管加到柱顶部,打开下端活塞,让液面下降到柱面以下1mm,关闭活塞,加数滴石油醚,打开活塞,使液面下降,几次反复,使色素全部进入柱体。
在柱顶加1.5cm洗脱剂——9:1(体积比)石油醚—丙酮。打开活塞,用锥形瓶收集。当第一个有色成分即将滴出时,取另一锥形瓶收集,得橙黄色溶液,即胡萝卜素。
2.结果与讨论
2.1提取
由于甲醇与乙醇的极性相近,但是乙醇易得、无毒,所以用3:2的石油醚一乙醇通过浸泡的方法提取菠菜色素,而不是用石油醚—甲醇。
2.2分离
薄层层析
薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,可以用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离。实验中涉及的菠菜色素的比移值(Rf)(薄层色谱法中原点到斑点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值)列表如下:
在一定的色谱条件下,特定化合物的'Rf值是一个常数,因此有可能根据化合物的Rf值鉴定化合物。
菠菜色素中各种色素的比移值Rf大小为:胡萝b素> 叶黄素>叶绿素,按此顺序它们的非极性依次减弱。物质极性的判断为柱层析中洗脱剂的选择提供了参考价值。
柱层析
胡萝卜素极性最小,因此胡萝卜素的洗脱剂用极性较小的9:l的石油醚-丙酮溶剂效果较好。但要收集其他几种色素得换用其他的洗脱剂,因为色素的极性各不相同,且有一定差别。如用7:3石油醚-丙酮分离叶黄素.分离出胡萝卜素和叶
黄素后,可加大溶剂极性以较快速度洗脱叶绿素.用3:1:1的丁醇-乙醇-水洗
脱剂洗脱叶绿素。
3.结论
采用浸泡法提取色素比抽滤法更好。在薄层层析时,用石油醚-丙酮=8:2时,能更明显的看到分层。在柱色谱洗脱剂的选择上,基于薄层分析的极性判断选择了石油醚-丙酮=9:1的溶剂作为洗脱剂,取得了非常好的效果。通过实验,进一步认识到洗脱剂在柱层析中的重要性。
从菠菜中提取叶绿素实验报告三
【实验目的】
1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质的分离提纯与方法。
2、通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
【实验原理】
叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素A(C55H77O5N4Mg)和叶绿素B(C55H70O6N4Mg)胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯,有三种异构体;
叶黄素(C40H56O2)是胡萝卜素的羟基衍生物。是胡萝卜素的羟基衍生物。当提取时,从上到下颜色依次为:黄绿色,蓝绿色,黄色和橙色。
【实验仪器】
研钵,色谱柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化铝,菠菜叶,烧杯,漏斗,玻璃棒,滤纸,剪刀,脱脂棉,纱布。
【实验步骤】
1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨,研磨时放入少量碳酸钙,防止研磨过猛破坏叶绿素结构,研磨至烂。
2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,盖上表面皿,防止有机溶剂蒸发。按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。
3、浸泡期间,填充色谱柱,在最下面垫入脱脂棉,再盖上一个小滤纸片,装入氧化铝至4/5处,再盖上一层滤纸片。
4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中,转入分液漏斗,加入10mL水洗涤,除去水层(下层),再用10mL水洗涤一次。
5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中,加几滴丙酮既可以看到颜色变化。
6、洗净仪器,收拾实验室,打扫卫生。
【注意事项】
1.过滤时不能用滤纸,而是用脱脂棉。原因是滤纸能吸收色素,降低滤液中色素的含量,使实验效果不明显。
2.加入丙酮后要迅速、充分研磨,以防止丙酮挥发,使更多的色素溶解在丙酮中。
3.萃取过程中注意操作,防止溶液喷出。制备薄层板过程中注意基板的质量,防止玻璃边缘伤及手指。
4.牢记有机化学实验常规安全防范和急救措施。
第2篇:叶绿素的提取与分离
叶绿体色素的提取、分离
及理化性质的测定
实验名称:叶绿体色素的提取、分离及理化性质的测定
班级:11级生科2班
组员:XXX XX
实验原理:叶绿体色素又称光合色素,在高等植物中可分为叶绿素和类胡萝卜素两大类,前者包括叶绿素 a(蓝绿色)和叶绿素 b(黄绿色),后者包括胡萝卜素(橙色)和叶黄素(黄色),它 与 们 类囊体膜上的蛋白质结合形成色素蛋白复合体,不溶于水,易溶于酯,因此可用丙酮、乙醇、石油醚等有机溶剂进行提取。
层析的基本原理:在分离过程中,由一种流动相(即一种液体或气体)带动着试样经过固定相(一种支持物,如纸)向外扩散,由于试样在两相中的溶解度不同和固定相对试样中不同成分的吸附程度有别,当用适当的溶剂推动时,混合物中各成分在两相间具有不同的分配系数,所以它们的移动速度不同,经过一定时间层析后,可使试样中的各种组分得到分离,在做纸层析时,由于纸对光合色素中各种色素分子的吸附程度不同,以及这些色素分子在溶剂四氯化碳(推进剂)中溶解度也有差异,以致溶剂带动色素分子向四周移动时,各种色素分子沿纸扩散的速度也就不同,使混合色素分离,出现不同颜色的环。将提取的叶绿素溶液置于光下,在透射光呈绿色,在反射光下呈樱桃红色,种 这 现象称为荧光现象。在反射光下叶绿素溶液之所以呈樱桃红色,是因为叶绿色分子吸收光能后处于激 状 发 态,激发态的叶绿素分子很不稳定,当它回到基态时,将所获得的能量以辐射能的形式发射出红光量子。叶绿素的化学性质很不稳定,容易受强光、高温等的破坏,特别是当叶绿素与蛋白质分离以后,破坏更快,而类胡萝卜素则较稳定。叶绿素中的镁可以被 H+所取代而成褐色的去镁叶绿素,后者遇铜后,其中的氢(H+)又被铜(Cu2+)取代,形成了铜代叶绿素,便由褐色转变成蓝绿色,铜代叶绿素很稳定,且比原来的绿色还要稳定些,在光下也不易被破坏。
材料与设备试剂: 1.材
料
新鲜的菠菜或小白菜等其他绿色植物叶片。
2.设
备
电子天平、研钵、烧杯、量筒、培养皿、刻度试管、试管夹、试管架、酒精灯、剪刀、圆形滤纸、小漏斗等。3.试
剂
丙酮、四氯化碳、无水硫酸钠、6碳酸钙等。方法与步骤 :
一、1.叶绿体色素的提取
2.取菠菜或其他植物新鲜叶片 5g,洗净,擦干,去掉主脉后剪碎,放入研钵中。
mol/L 盐酸、醋酸铜粉末、取材及实验前准备工作
3.在研钵中加入少量碳酸钙和约 3-5mL 丙酮后,研磨成匀浆,研磨过程中根据情况加入一定量的丙酮以利于研磨,匀浆用多层纱布过滤到试管中。
4.在残渣中再加入 3~5绿色溶液近10mL 丙酮,研磨过滤,共得深
mL,其中含有叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素、胡萝卜素等色素及其它脂溶性物质。
二、1.叶绿体色素的分离
2.纸层析分离法
具体操作为:
1.先用条滤纸(2cm×4cm)沿长度方向卷成一个紧实的纸芯。
取一张圆形层析滤纸(直径,略大于培养皿直径),在其中心位置钻一个纸芯粗度的圆形小孔(滤纸不能折叠),将卷好的纸芯一端插入孔内少许,并剪去纸芯上端多余部分,使纸芯上端与滤纸恰好平齐,下端长约 1.5培养皿盖高度同)。
cm(与
2.把个这带纸芯的圆形滤纸,平放在干净的培养皿上,用细玻璃滴管吸取少量叶绿体色素的丙酮提取液,小心地滴入纸芯上端7~10 滴。注意:一定要在色素斑点稍风干后,再滴入另一滴,而且液滴不能污染滤纸。
3.向培养皿中倒入适量(约为培养皿高度的 1/3 左右)四氯化碳,并加入一勺(适量)的无水硫酸钠,使纸芯下端浸入其中,并立即盖上培养皿。此时,推动剂借毛细管引力顺纸芯扩散至圆形滤纸上,并把叶绿体色素向四周推动,数分钟后,就可见到滤纸上出现四或五个颜色不同的同心环,并逐渐扩大。
4.当推动剂前沿接近滤纸边缘时(约 30min 左右),取出滤纸,即可看到分离的各种色素,用 笔 铅 标出各种色素的位置和名称,并绘简图示之或拍摄图片。
三、叶绿体色素的理化性质 1.荧光现象
观察叶片丙酮提取液(稀释前的浓提取液)在反射光和透射光下的颜色有何不同并拍摄图片。叶绿体色素溶液在反射光下呈樱桃红色,在透射光下呈绿色,说明原因。
光对叶绿素的破坏作用取叶绿体色素提取液少许,分装于 2 支试管中,一支放在黑暗处或用黑纸遮光);另一支放在强光下(阳光直射),经 0.5~1颜色有何不同并拍摄图片。
h后,观察 2 支试管中溶液
2.氢和铜对叶绿素中镁的取代作用
取 2 个试管,A管中加入稀释后的叶绿体色素提取液 2mL,作为对照;在B管中加入稀释后的叶绿体色素提取液5mL并加入1~2滴浓盐酸,匀摇,溶液变为褐色,拍摄图片,此时叶绿素中的镁(Mg2)被氢(H)取代而生成了去镁叶
+
+绿素。
从 B 管中分出一半装人 C 管,作为对照,在 B 管余下的溶液中加入一小粒醋酸铜结晶,将 B管和 C 管都在酒精灯上慢慢加热,则 B管中的溶液又转变在蓝绿色,拍摄图片,这是因为其中的氢(H+)又被铜(Cu2+)取代,形成了铜代叶绿素。
【注意事项】
(1)研磨叶片要充分,否则提取的叶绿体色素溶液浓度稀,荧光现象不明显。
(2)纸层析时,纸芯一定要卷实,分离色素用的圆形滤纸在中心打的小圆孔周围必须整齐,否则分离的色素不是一个同心圆。
(3)色素的提取、展层均应在弱光或暗室内绿光下进行,以防止光破坏色素,影响实验结果。
(4)实验用的有机溶剂较多,且都易挥发,取时动作要快、取后要随时加盖。【思考题】
(1)图示叶绿体色素纸层析结果,用笔铅分别标出叶绿素 a 和叶绿素 b、叶黄素、胡萝卜素。
(2)研磨提取叶绿体色素时加入 CaCO3和石英砂各有什么作用?
CaCO3是为了保护叶绿素不被破坏,石英砂是为了研磨更加充分。
(3)根据 Cu2在叶绿素分子中的替代作用,对制作绿色标+本有何指导意义?
铜在叶绿素分子中替代镁,生成铜代叶绿素,此种化合物稳定,颜色鲜艳。用在植物标本保存中,经这样处理的标本,可常年保持绿色。
第3篇:从烟草中提取烟碱
从烟草中提取烟碱
主要仪器与试剂
仪器:烧杯,微型布氏漏斗,抽滤瓶,分液漏斗,圆底烧瓶,锥形瓶。
试剂:干燥烟叶2g,5% NaOH溶液20mL,乙醚15mL,饱和苦味酸甲醇溶液,甲醇
1、碱处理。在25mL烧杯中加入2g干燥碎烟叶和2mL 5% NaOH溶液,搅拌10min,然后用带尼龙滤布的布氏滤斗抽滤(1),并用干净的玻塞挤压烟叶以挤出碱提取液。接着用4mL水洗涤烟叶,再次抽滤挤压,将洗涤水合并至碱提取液中。
2、醚萃取。将黑褐色滤液移入25mL分液漏斗中,用15mL乙醚分三次萃取。萃取时应轻旋液体,勿振荡漏斗以免形成乳浊液导致分层困难。上层醚相从漏斗上口倒入25mL圆底烧瓶中(2)。
3、蒸去乙醚。合并醚萃取液,在水浴上蒸去乙醚(3),并用水泵将溶剂抽干。
4、重新溶解。残留物中加入2滴水和1mL甲醇,使残渣溶解,然后将溶液通过放有玻璃毛的短颈漏斗滤入25mL烧杯中,并用1mL甲醇涮洗烧瓶和玻璃毛,合并至烧杯中(4)。
5、制备衍生物。在搅拌下往烧杯中加入2mL饱和苦味酸盐的甲醇溶液,立即有浅黄色
第4篇:从牛奶中提取酪蛋白
实验二 从牛奶中提取酪蛋白
一、实验目的要求
1.学习从牛乳中制备酪蛋白的方法。
2.了解从牛奶中制取酪蛋白的原理。
二、实验原理
牛乳中的主要蛋白质是酪蛋白,含量约为3.5g/100ml。酪蛋白是含磷蛋白质的混合物,相对密度1.25-1.31,不溶于水、醇、有机溶剂,等电点为4.7.利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的pH值调至4.7时,酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物,除去脂质杂质后便可得到纯的酪蛋白。
三、原料与器材
鲜牛奶、恒温水浴锅、台式离心机、抽滤装置。
四、试剂
1.95%乙醇
2.无水乙醚
3.0.2mol/l的醋酸-醋酸钠缓冲液
A液(0.2mol/l的醋酸-醋酸钠溶液):称取NaAc.3H2O54.44g,定容至2000ml。
B液(0.2mol/l的醋酸-醋酸钠溶液):称取优级纯醋酸(含量大于99.8%)12.0g,定容至1000ml。取A液1770ml与B液1230ml混合即得pH4.7的醋酸-醋酸钠缓冲液3000ml。
4.乙醇-乙醚混合液
乙醇:乙醚=1:1(体积比)。
五、操作步骤
1.将
第5篇:绿叶中色素的提取和分离的实验报告
绿叶中色素的提取和分离的实验报告
一、实验目的 1.学会提取和分离叶绿体中色素的方法。2.比较、观察叶绿体中四种色素:理解它们的特点及与光合作用的关系
二、实验原理 光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上,而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂 中。故要提取色素,要破坏细胞结构,破坏叶绿体膜,使基粒片层结构直接与有机溶剂接 触,使色素溶解在有机溶剂中。叶绿体中的色素有四种,不同色素在层析液(脂溶性强的有机溶剂)中的溶解度不同,因而随层析液的扩散速度也不同。
三、材料用具 取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙。
四、实验过程(见书P54)1.提取色素: 2.制备滤纸条: 3.色素分离,纸层析法。(不要让滤液细线触及层析液)4.观察: 层析后,取出滤纸,在通风处吹干。观察滤纸条上出现色素带的数目、颜色、位置和宽窄。结果是:4条色素带从上而下依次是:胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色
第6篇:C语言从txt中提取数据
#include #include #include int main(int argc,char *argv[]){
FILE *fp;
int flag=0;
int list_line=0,list_row=0;
int i=0,j=0;
int line_title[50];
char c;
double row_title[10];
double list_data[50][10];
if((fp=fopen(“E:Study _distribution.txt”,“r”))==NULL)//C语言中文件路径索引是双斜杠
{
printf(“Can't open that file!”);
exit(1);
} // 通过对每个字符的判断来达到 对几乎任何排列比较规整的txt表格书写格式的 数据读取
// 最主要依靠的是fscanf对数据类型格式的 自动判断
while(!feof(fp))
{
fscanf(fp,“%c”,&c);
//若对文档全部进行字符输出,可观察到数据、空格、tab、以及回车 之间的相对位
第7篇:从生活中提取写作的素材
从生活中提取写作的素材
百色市右江区龙川镇平乐小学
教师
陆惠红
叶圣陶先生说过:“作文这件事离不开生活,生活充实到什么程度,才会做成什么文字。”古代教育家朱熙的名句:“问渠那得清如许,为有源头活水来。”不仅道出了学习的方法,同时也说明作文的源头是生活。只有在生活实践中才能获得真知,求的发展,笔者人为,要学生写好作文,最有效的途径是指导学生从生活的内容入手,有意识地指导学生观察家庭生活,学校生活,社会生活,从中提取写作的素材。以下结合自己的作文教学实践,谈谈如何指导学生写作的一写感受。
一.从家庭生活中提取
家庭生活是学生第一个接触的生活环境,对学生的影响很大,是习作不可缺少的素材。为了培养小学生的主人翁意识,教师可以要求学生帮助父母亲做一些力所能及的家务。启发学生认真留心,体会家庭生活,日常生活的丰富多彩。然后以此为写作素材。如:《今天我当家》,《我学会了炒菜〉》,《第一次洗衣》等等一篇篇反映家庭生活的文章出现在学生的笔下。二.从学校生活中提取
学习最好刺激,是对所学材料的兴趣,丰富多彩的学校生活是学
