生物科学类实习报告_生物专业实习报告

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实习报告

刘永伟08生科1班200830710116

2011年7月4日至8月25月，我于广东省农科院兽医研究所人兽共患病研究室进行了近两个月时间的实习工作。在这段时间里，我不但在专业知识和技能上得到了锻炼和提高，在工作上也得到了很好的认识，填补了过往工作经验上的空白。另外，在研究室里获得很多前辈们的教导与帮助，让我心存感激。

初入研究室，老师与师兄带领我和另外四名同学了解实验室的结构，洗刷房、主实验区、PCR房、电泳房、细胞培养室，逐个去参观。然后让我们去清查每个柜子里的药剂、耗材等物品，贴上标签和清单，一来是整理实验室用品，二来是让我们尽快熟知每样实验室用品所在位置。

我们的基础工作由装移液枪枪头开始，到试管、三角瓶、西林瓶、离心管等各种用品高温灭菌前的包装，高温灭菌机的使用。学习离心机、PCR仪、分光光度计等各种仪器的使用和操作。学习配各种LB培养液，有液体的，固体的。固体培养基在灭菌后还要进融化倒平板。打开实习记录的笔记本，每一页都记录着工作内容以及试剂的存放地方（如4℃冰箱），以便查找。这是我这一个多月以来的工作收获，每天在实验室都有事情做，虽然不是很辛苦，但细心、耐心是从事实验室工作的最基本的能力要求。第一周，先熟悉下实验室的环境，有摇床、分光光度计、离心机等仪器；了解下实验设备的大致用法，如无菌操作台操作前需要打开紫外灯照射20分钟；做些最基本的操作：如装移液枪的枪头、搞好实验室的卫生;看着工作人员做着实验，我不懂就问，虚心请教；到了第二周就有机会真正跟着工作人员学习怎样操作，老师做着实验，我在一旁看着，听着他说哪些要注意的事项等等，认真做好笔记，属于模仿、学习的阶段；往后的时间就是自己操作，然后不懂的地方就请教老师，与工作人员互相讨论，找出解决问题的办法。

等熟识了基础工作后，我们五人开始分别各跟随一位前辈去负责项目里的不同工作。我跟随着李志强师兄作构建沙门氏菌质粒致死平衡系统的研究。

研究的具体内容是基于大肠杆菌（E.coli）染色体上asd基因的已知序列，利用λ噬菌体的Red同源重组系统一步法构建E.coli DH5α的asd基因缺失突变株E.coli DH5αΔasd::cat，在二次重组中利用携带能够表达FLP位点特异性重组酶的质粒Pcp20介导二次同源重组，以去除上述缺失突变株中氯霉素抗性筛选基因。结合PCR扩增和测序结果，证明DH5αΔasd缺失突变株的正确构建。该缺失突变株失去了在普通LB培养基上生长的能

力，只有添加DAP或导入表达asd基因的质粒（asd基因互衬试验）才能在LB培养基上生长，与原型DH5α比较，其生长速度和生长对数期、接受不同拷贝数质粒的转化效率几乎相一致，基于 该缺失突变株构建出以asd营养基因为标志的大肠杆菌染色体-质粒平衡致死系统。

在整个实验步骤中，要进行三次DNA片断或质粒转化，可以用CaCl2法或电转法，而进行转基因，就要制备感受态细胞。感受态细胞的制备过程非常繁复，而且耗时多，温度同时间要掌握得适当，制备出的感受态细胞的转化率就会非常低下，我在初期经常会在这过程中出错，导致浪费了不少资源和时间，令实验进展缓慢，但经过多次的实践，终于制备出效转化效率高的感受态细胞。而在化学转化或电转化过程中，受体菌的处理温度同样需要控制得好，并且操作动作要快，才能提高转化效率。

受体菌转入目的基因后，就要经过不同选择培养基的鉴定，倒平板和涂平板的技术就在这项工作中培养出了。除了培养基鉴定，还要进行琼脂凝胶电泳法鉴下转化细菌内是否含有目的基因。凝胶电泳时，要看样本DNA片断是否需要保留来配不同浓度的琼脂凝胶，并设定不同的电流电压进行电泳。点样要细心，不能逸溜，否则条带会不清晰。

通过实习，我熟习了细菌培养、转基因、制备感受态细胞等技术。虽然这些工作在学校的实验课时早已实践过，但我毕竟太不熟练，所以在前期我总会出错——接的菌总是受污染，而且还把瓶子里的培养基也污染掉等等。但兴幸李志强师兄是个很有耐心的人，他悉心地教导我，令我改掉以前粗心大意的坏习惯，终于让我可以胜任实验室里极需细心的工作。在实验室里，老师们的言传身教以及他们的以身作则，让我受益匪浅，也让我知道：一个人的成功是靠自己的努力积累出来的，不是一朝一夕的事情。除了李志强师兄，还要向研究室里，体恤人心的向华老师，认真负责的陈少勤师姐，耐心能干的徐敏师兄，平和敬业的王博士，辛勤无怨的黄元师兄，还有负责洗具，和蔼可亲的张姐道谢，感助这段期间给我们提供的帮助与教导。

在日常的工作中，研究室的前辈们经常会跟我们讨论实验中的问题和操作规范，这让我们获益匪浅，改正了一些不良的实验习惯。实验过程中，操作难免会出错，那么我们对已造成错误的事情的态度要摆正，因为第一，你做的不单单是自己的实验，你的出错若隐瞒过去，先不说你不诚实，而是这将影响了整个实验室或多或少的成果，即便是试剂放在哪都要在实验记录本上写清楚，以便其他人查找；实验中加错了试剂或剂量加错了，即使试剂很贵，你仍要坦白说出，只要吸取教训，以后做实验更加谨慎才好。“无规则不成方圆”真的是体会到了，每一步都要遵循一定“规则”，不能随心所欲，否则后果会比你想象的严重。通过实习中出错这件事，我从中体会到以后不管你从事什么样的工作，都必须认真细心，任何工作都不分轻重，要一视同仁，认真对待。

一个多月的实习，让我填补了生物工作上的空白，熟习了很多基础技术，是一个很宝贵的经验，是我进入社会前获得的又一宝贵财富。我深刻体会到生物科研工作是需要极强大的耐性、毅力和细心，在此为所有生物工作者致敬。