分子生物学思考题_分子生物学思考题答案
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思考题
1.基因诊断：利用分子生物学技术，检测基因结构(DNA)及其表达(RNA)是否正常，从而对疾病作出诊断的方法。
RFLP：若突变(多为中性突变)导致某一限制性核酸内切酶识别位点改变(获得或丢失 ——遗传标记)，经酶切后，出现DNA片段长度的差异，在人群中形成两种或两种以上的限制性类型，并按孟德尔规律遗传，称为限制性片段长度多态性。
微卫星： 以 2~6 bp的核心序列为单位，彼此连接、重复排列的DNA串联重复序列，也称短串联重复序列。
等位基因特异寡核苷酸探针杂交法 原理
① 设计和制备涵盖突变位点的一对正
常寡核苷酸探针(无突变序列)和突变寡核苷酸探针；
② 病人的DNA样品一分为二，分别吸
附于杂交膜上；
③ 利用正常探针和突变探针分别进行
探针杂交； ④ 作出诊断。
DNA突变对酶切位点的影响，若突变位点发生在限制性识别位点内，可丧失相应的酶切位点。若突变位点发生在限制性识别位点外，可产生新的酶切位点。原理：基因突变—限制性内切酶识别位点改变（丧失或增加）—经限制性内切酶酶切—限制性片段长度或数量改变—Southen印迹—探针杂交显示—分析诊断。
若致病基因与同一条染色体上的某一RFLP存在连锁关系，则可从RFLP家谱分析中间
接推知致病基因的存在。连锁关系：
① RFLP 主要存在于某一致病基因的染色体上，正常基因时则极少出现
② RFLP 主要存在于某一正常基因的染色体上，基因异常时则极少出现
1.针对性强：检测对象是病变的基因、异常表达的基因或病原体基因，属于病因诊断或发病原因分析。
2.特异性高：所用的分子生物学技术能特异的检出致病基因。如分子杂交技术采用特异序列探针，PCR采用特异序列引物，通过互补识别致病基因。
3.灵敏度高：只需极微量的标本，就能做出分析诊断。
① 分子杂交技术采用放射性同位素、酶或化学发光试剂标记探针，有很高的放大灵敏度；
② PCR 扩增技术采用循环扩增至百万倍再分析致病基因，因而灵敏度更高。
4.易获得稳定的结果：核酸特别是DNA比蛋白质稳定，并且对核酸标本要求不高 5.可快速、早期诊断疾病：疾病的发生几乎都离不开自身基因结构或功能的异常，而基因诊断技术常只需数小时即可在基因水平上做出判断。
6.适应范围广：可对遗传病、感染性疾病作出诊断，也可作癌症的基因检查分析，以及在法医学上进行个体识别、亲子鉴定等。
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