超声破碎仪_超声波破碎仪
超声破碎仪由刀豆文库小编整理,希望给你工作、学习、生活带来方便,猜你可能喜欢“超声波破碎仪”。
快速入门指南和操作步骤
我们建议您按照本指南中的步骤操作。我们不鼓励在一开始就测试自行设计的协议,因为这样做会很耗时,并且可能会误导仪器的性能。
目的:安装EpiSonic。请参阅用户手册中的第7页以获取完整的可视安装说明| 预计时间:15分钟
注意:开箱时请注意所有组件的位置,以便在运回时可以将所有组件快速重新包装到正确的位置。
样品处理喇叭组件:
1.将转换器连接到样品处理喇叭。
2.用扳手拧紧(手拧不够,会影响结果)。
3.将流量管连接到样品处理喇叭上的黑色接头。
4.将转换器电缆连接到转换器。通过顺时针转动紧固机构来锁定连接。再循环冷却器组件:
1.将电源适配器连接到循环冷却器。
2.将电源线连接到电源适配器。将电源线插入接地的电源插座。主要组装:
1.将流量管穿过隔音罩,并在转换器电缆穿过时将组装好的转换器放置在隔音罩的内座上。确保电缆不被卡住。
2.将管架(或可选的板架)放入样品处理喇叭。
3.在每个流量管的裸露端装上白色配件。然后将水释放连接器连接到一个白色配件。将线路滤波器连接到其他白色配件。
4.将放水连接器连接到循环冷水机组的“电源”连接和管路过滤器,以再循环冷水机组的“返回”连接。
5.将转换器电缆连接到超声波发生器。通过顺时针转动紧固机构来锁定连接。6.将电源线连接至声波发生器。将电源线插入接地电源插座。验证:
目的:确保EpiSonic已经设置并正常工作| 预计时间:15分钟 1.将样品处理喇叭的容器填充到200毫升冷过滤水中。
2.打开循环冷却器。让水流入管道。在10分钟内确保冷水机的屏幕温度达到10°C。关闭冷水机组。
3.打开超声波发生器。手动运行振幅设置为20%的程序10秒钟。如果瓦特的输出读数低于5瓦,那么您可能需要将转换器重新拧紧到超声处理喇叭。操作-0.2毫升管 目的:按照给定的步骤剪切你的样品 预计时间:30-45分钟
需要外部材料
EpiSonic™0.2 ml带帽试管(Cat#EQC-1000-X02)感兴趣的DNA样品:
高质量的非降解基因组DNA 开始大小超过50kb 缓冲液:1×TE或Tris-HCl(10mM,pH8.0)+ EDTA(1mM)
注意:在任何形式的超声波处理过程中,偶尔溶液中的溶液可能会分离到管道或管道的内侧,这可能会影响剪切的DNA大小。为了达到最佳效果,在进行每20次超声波处理循环后,可以将样品短暂离心或轻轻敲下,以恢复孔底部的样品体积,特别是当溶液分离到管盖或管壁两侧时。
要么;染色质样品的兴趣
来自细胞系的高质量,未降解的染色质提取物 每管中30μlChIP缓冲液中含有4μg染色质 缓冲区:可以使用任何常见的ChIP缓冲区;EpiSonic™ChIP缓冲液(建议使用EQC-1000-CCB型号,以获得最佳效果。
注意:染色质的剪切结果可能受染色质数量,细胞/组织类型,剪切缓冲液的洗涤剂浓度和样品粘度的影响。因此,用户可以根据实际情况进一步优化染色质剪切条件。一般而言,样品粘度可能对超声处理结果具有显着的影响。强烈建议在超声处理前和超声过程中仔细均匀化染色质样品。为获得最佳结果,在超声处理过程中每20个工作循环执行一次后,应将样品短暂离心,以恢复管底部的样品体积,尤其是当溶液分离到管盖或管壁两侧时。
声音程序
1.将200毫升过滤水加入样品处理喇叭。将管架放入样品处理喇叭。放置管架,使指孔与样品处理喇叭的橡胶边缘上的流量管连接孔对齐。
2.将循环冷却器设置为目标温度至少4°C。打开预冷几分钟,直到循环冷却器的读数温度读数为4°C。确保水完全流入流量管。
3.按照超声波发生器的屏幕指示导航屏幕。如有需要,请参阅用户手册第11页上的“操作”部分以获得进一步的帮助。
4.将起始幅度设置为30%(稍后可能需要在步骤6中进行调整)。然后根据下表设置程序设置(阴影时间是需要输入到EpiSonic的设置): DNA剪切:
对于染色质剪切:
* 1占空比= 1脉冲开启时间+ 1脉冲关闭时间 提示:如果碎片太长,则一次增加5个占空比
5.将条带帽切成单个帽,然后盖上每个样品管。小心地将样品管(1-12)插入管架。管中的样品应完全浸没在水中(水位应比管中样品高2-3mm)。
提示:为了在同时运行少于12个样品的情况下提高重现性,请插入仅包含相当于样品量的缓冲液的模拟管,用于剩余未使用位置。
6.关闭声音机箱的盖子。按下“STOP / START”键开始超声处理程序。EpiSonic现在将在这些设置下运行。只要EpiSonic开始超声处理,快速调整幅度,直到它对应于约140瓦的平均功率输出。
7.一旦程序完成,拿出管。如果液体收集在管壁的一侧,则将液体简单地离心到底部。DNA可以使用或以其他方式储存在-20℃。剪切后的染色质可用于ChIP测定或以其他方式储存于-80℃。清理
预计时间:5分钟
1.关闭循环冷却器和超声波发生器。
2.从循环冷却器上断开放水连接器和线路过滤器释放连接器。
3.在水槽或烧杯顶部放下流量管,同时断开放水连接器和管路过滤器的虹吸出水。确保它们尽可能地排水,因为残余的水会不适当地增加未来运行的水量。
4.从样品处理喇叭筒中取出所有的容器和容器架。使用干净的布或纸巾彻底擦拭样品处理喇叭表面的多余水分。让Sound Enclosure打开几个小时,让它干燥。
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